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毛形屬線蟲疫苗的制備方法及醫(yī)用用途

公開(公告)號(hào) CN1843510A  
公開(公告)日 2006.10.11  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510016689.8  
申請(qǐng)日期 2005.04.06  
專利名稱 毛形屬線蟲疫苗的制備方法及醫(yī)用用途  
主分類號(hào) A61K48/00(2006.01)I  
分類號(hào) A61K48/00(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I;A61P33/14(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 張西臣  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 張西臣;李建華;王靜敏;宮鵬濤  
地址 130062吉林省長(zhǎng)春市西安大路175號(hào)軍需大學(xué)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 陳宏偉  
國(guó)省代碼 吉林;22  
主權(quán)項(xiàng) 毛形屬線蟲疫苗的制備方法,包括以下步驟: 首先獲得純凈的毛形屬線蟲,然后提取RNA,分離純化mRNA,合成cDNA第一條鏈及cDNA第二條鏈,將cDNA與ECORI適配子連接并對(duì)連接產(chǎn)物磷酸化,后分離cDNA片段,并與λZAP載體連接,進(jìn)行噬菌體包裝,測(cè)定所構(gòu)建cDNA文庫(kù)滴度及重組率后進(jìn)行文庫(kù)擴(kuò)增,提取λ噬菌體DNA,并進(jìn)行cDNA文庫(kù)插入片段檢測(cè),獲得毛形屬線蟲cDNA文庫(kù);利用抗體或探針篩選功能性抗原基因,將篩選的功能性基因與真核基因表達(dá)載體連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒,獲得毛形屬線蟲核酸疫苗。  
摘要 本發(fā)明提供一種毛形屬線蟲疫苗,包括其核酸疫苗及基因工程苗的制備方法:將毛形屬線蟲RNA提取,分離純化,合成cDNA第一條鏈及第二條鏈,將cDNA與ECORI適配子連接并對(duì)連接產(chǎn)物磷酸化,后分離cDNA片段,并與λZAP載體連接,進(jìn)行噬菌體包裝,提取λ噬菌體DNA,并進(jìn)行cDNA文庫(kù)插入片段檢測(cè),獲得毛形屬線蟲cDNA表達(dá)文庫(kù)。將篩選的功能性基因與真核基因表達(dá)載體連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒,制備毛形屬線蟲核酸疫苗:將功能性抗原基因與原核表達(dá)載體連接,轉(zhuǎn)化DH5α菌,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,進(jìn)行高效表達(dá),獲得毛形屬線蟲基因工程疫苗。本發(fā)明產(chǎn)品可用于腫瘤疾病,性功能低下等免疫功能低下或缺陷引起疾病的預(yù)防和治療。  
國(guó)際公布  
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