| 公開(公告)號(hào) | CN1940087A |
| 公開(公告)日 | 2007.04.04 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610030229.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.08.18 |
| 專利名稱 | 一種同步擴(kuò)增檢測肝炎及艾滋病毒核酸的方法及試劑盒 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 上海科華生物工程股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 周科隆;華錦彪;王 縵 |
| 地址 | 200233上海市漕河涇新興技術(shù)開發(fā)區(qū)欽州北路1189號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 陸 飛;盛志范 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種同步擴(kuò)增檢測肝炎及艾滋病毒核酸的方法，其特征在于包括：基于雜交原理，選用磁珠作為自動(dòng)化介質(zhì)，采用磁珠分離儀進(jìn)行特異性同步捕獲HIV、HBV和HCV病毒核酸的方法，其中，選用與后續(xù)擴(kuò)增檢測中一條引物序列相一致的生物素修飾的寡核苷酸作為核酸提取試劑的捕獲探針；或者，設(shè)計(jì)一段中間探針，與后續(xù)的熒光PCR體系中的一條引物序列相一致的無修飾的寡核苷酸，在其3’端連接一串Oligo(dA)18-25，作為中間雜交的主干探針，使用生物素修飾的Oligo(dT)25作為通用雜交捕獲探針；或者，合成一條包含上述HBV、HCV、HIV特異探針序列的線形排列的寡核苷酸，作為一條三聯(lián)共同探針，其中間間隔連接3-8個(gè)T或A，生物素的修飾仍位于共同探針的5’端。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬診斷試劑核酸診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種同步提取并同步擴(kuò)增均相檢測肝炎和艾滋病毒核酸的方法和試劑盒。該方法包括以磁珠作為自動(dòng)化介質(zhì)，特異性同步捕獲HBV、CHV、HIV核酸的方法。RNA外標(biāo)和RNA內(nèi)標(biāo)快速加端生物素引物的PCR構(gòu)建和純化，實(shí)時(shí)同步多項(xiàng)檢測的基于Tagman探針的T-PCR擴(kuò)增法等。相應(yīng)的試劑盒包括去抑制劑、裂解液、磁珠懸液、洗滌液、洗脫液、內(nèi)對(duì)照、RT-PCR反應(yīng)液、酶混合物、熒光探針、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照。本發(fā)明的的特點(diǎn)是：單管操作，封閉性檢測，自動(dòng)化程度高，多種病毒核酸同步提取，同步實(shí)時(shí)檢測；靈敏度高，特異性好，精密度高；適用于大規(guī)模血液篩查和大容量的臨床檢測。 |
| 國際公布 |
