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乙型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法及專用試劑盒

公開(公告)號 CN1944673A  
公開(公告)日 2007.04.11  
申請(專利)號 CN200610044679.X  
申請日期 2006.06.12  
專利名稱 乙型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法及專用試劑盒  
主分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;G01N33/96(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心  
發(fā)明(設(shè)計)人 魯艷芹;韓金祥;王傳璽;戚 鵬;沈忠林  
地址 250062山東省濟南市歷下區(qū)經(jīng)十路89號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 鮑光明  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 一種乙型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法,包括引物和對應(yīng)探針,乙肝病毒DNA的提取,對血清樣本中提取的血清DNA進行熒光定量PCR擴增,對乙肝病毒的定量檢測,其特征在于,所述引物和對應(yīng)探針是源于乙肝病毒表面抗原S區(qū)的基因保守區(qū)域的探針和引物序列,上、下游引物和探針序列分別為: RSU:5’AGAATCCTCACAATACCGCAGAGT 3’ RSL:5’CACACGGTAGTTCCCCCTAGAA 3’ PS:5’FAM-AGACTCGTGGTGGACTTCTCTCAAT-TAMARA 3’。  
摘要 乙型肝炎病毒熒光定量PCR檢測方法及專用試劑盒,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的方法是通過對乙型肝炎病毒表面抗原,核心抗原和E抗原區(qū)等三對不同的引物和探針的優(yōu)化,篩選出了擴增效果最好的一對引物和探針。比較了用不同方法提取的血清DNA樣本進行熒光定量PCR擴增時乙肝病毒拷貝數(shù)的變化,優(yōu)化了乙肝病毒的提取方法。本發(fā)明采用優(yōu)化的引物和探針以及簡單的病毒DNA提取方法進行定量PCR檢測,具有靈敏度高,特異性強,成本低廉,耗時短,檢測準(zhǔn)確等優(yōu)點。本發(fā)明還提供了用于本發(fā)明方法的試劑盒。本發(fā)明可以用于臨床及科研中對乙肝病毒患者血清HBV的定量檢測,從而指導(dǎo)臨床治療。  
國際公布  
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