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附子—生物堿的含量測定方法—RP-ion-pair-HPLC

  
方法名稱:
  附子—生物堿的含量測定—RP-ion-pa ir- HPLC
應用范圍:
  用于附子中生物堿的含量測定
方法原理:
 本品用濃水浸潤,再用二氯甲烷超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在230nm處測定,按外標法計算含量。
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備    日本島津LC-10AT高效液相色譜儀;SPD-10A紫外檢測器;Class-VP色譜工作站。

色譜條件   AichromBond-1 C18柱; 流動相:乙腈-5mmol·L-1 NaH2PO4 溶液(磷酸調(diào)至pH 4.5,50∶50, 內(nèi)含7mmol·L-1 SDS;檢測波長:235nm;流速:1.0 mL·min-1;柱溫:35℃。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  精密稱取苯甲酰新烏頭原堿4.97mg、苯甲酰烏頭原堿2.02mg、北烏堿2.10mg、新烏頭堿1.89mg、烏頭堿2.02mg和次烏頭堿2.10mg,置10mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為混合對照品溶液A。精密吸取混合對照品溶液A 1mL,置25mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為混合對照品溶液B。

供試品溶液的制備   將附子藥材粉碎,過3號篩,取藥材粉末10g,精密稱定,加濃氨試液2 mL使其潤濕,密塞放置1h。加氨水飽和的乙醚100 mL,超聲處理2min,放置過夜。過濾,并用氨水飽和的乙醚洗滌3次,每次15mL,收集、合并所有濾液,于水浴上揮干溶劑。精密加入甲醇10mL溶解殘渣,過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液。
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取混合對照品溶液B和供試品溶液10μL,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,測定峰面積,按外標法計算各組分的含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻:
  劉秀秀,晁若冰等. 反相離子對色譜法測定附子中生物堿成分. 藥學學報.2006,41 (4) :365~369
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