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附子及其炮制品—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定方法—HPLC-D

  
方法名稱:
  附子及其炮制品—烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定—HPLC-DAD
應用范圍:
  用于附子中烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿的含量測定
方法原理:
 本品用濃水浸潤,再用乙醚超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在240nm處測定,按外標法計算含量。
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備    Aglient1100高效液相色譜儀;G1315B DAD檢測器。

色譜條件   色譜柱:Hpersile BDSC18(150mm×4.6mm,5μm);流動相:40mmol/l乙酸銨洗脫(濃氨水調(diào)pH10.0)(A)-乙腈(B)梯度洗脫,分析時間50min,0~45minA:B從85%:15%~40%:60%,45~50min保持在40%A;流速:1.0ml/min;檢測波長:240nm;柱溫:30℃;進樣量:10μl。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  分別精密稱取烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿對照品2.32mg2. 16mg,2.14mg置于同一10ml量瓶中,用0.05%鹽酸甲醇溶液溶解并定容至刻度,搖勻,即得對照品儲備液。

供試品溶液的制備   取不同產(chǎn)地生附子及炮制品適量,粉碎,過60目篩,分別取生附子粉末0.5g炮制品2g,精密稱定,置150ml具塞錐形瓶中,濃氨水2ml,濕潤0.5h,再加人乙醚75ml,密塞,放置過夜,超聲提取10min,濾紙過濾,再以25ml乙醚分次洗滌藥渣,過濾,合并濾液和洗液,40℃水浴揮干,0.05%鹽酸甲醇溶液溶解殘渣,并定容至5ml,搖勻,臨用前用0.45μm林微孔濾膜濾過,作為樣品溶液。
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取混合對照品溶液B和供試品溶液10μL,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,測定峰面積,按外標法計算各組分的含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻:
  王瑞,孫毅坤,王耘等. 高效液相色譜法測定附子及其炮制品中三種雙醋型生物堿.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展.2007,7(7):1078~1080
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