木通－齊墩果酸、常春藤皂苷元的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定木通中齊墩果酸、常春藤皂苷元的含量。

本方法適用于木通科植物木通Akebia quinata(Thunb.) Decne.、三葉木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.或白木通Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.var.australis (Diels) Rehd.的干燥藤莖。

本品粉末加甲醇超聲提取，濾液蒸干，殘渣水溶后，加水飽和正丁醇提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇、鹽酸、加熱水解，水解物用三氯甲烷提取，蒸干，殘渣加甲醇溶解、定容，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長210nm處檢測齊墩果酸和常春藤皂苷元的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2 .正丁醇

3 .鹽酸

4 .三氯甲烷

5 .冰醋酸

6 .三乙胺

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按齊墩果酸峰計算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 水 冰醋酸 三乙胺＝87 13 0.04 0.02

2.2檢測波長：210nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過四號篩)2g, 為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取其墩果酸對照品、常春藤皂苷元對照品適量，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過四號篩)約2g，精密稱定，加甲醇50mL，超聲處理（功率250W，頻率50kHz)30分鐘，濾過，殘渣用甲醇適量洗滌，合并濾液與洗液，回收溶劑至干，殘渣加水10 mL溶解，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇20 mL、鹽酸2 mL， 加熱水解4小時，水解物加水10 mL，用三氯甲烷振搖提取2次，每次20 mL，合并提取液，回收溶劑至干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長210nm處測定齊墩果酸（C₃₀H₄₈O₃)和常春藤皂苷元（C₃₀H₄₈O₄)的峰面積，計算出其含量。