方法名稱:
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方法名稱: |
銀杏葉提取物-總黃酮醇苷的測定-高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定銀杏葉提取物中總黃酮醇苷的含量。 本方法適用于銀杏葉經(jīng)加工制成的提取物。 |
方法原理: |
本品加甲醇-25%鹽酸溶液(4:1)加熱回流,冷卻,用甲醇稀釋,搖勻,濾過,續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長360nm處檢測槲皮素的吸收值,計算出其含量。 |
試劑: |
1. 甲醇 2. 25%鹽酸溶液 3. 0.4%磷酸溶液 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按槲皮素峰計算應(yīng)不低于2500。 1.3 紫外吸收檢測器 2色譜條件 2.1流動相:甲醇 0.4%磷酸溶液=50 50 2.2檢測波長:360nm 2.3柱溫:室溫 |
試樣制備: |
1. 稱取供試品 精密稱定本品35mg,為供試品。 2. 對照品溶液的制備 分別精密稱取槲皮素對照品、山奈素對照品、異鼠李素對照品,加甲醇制成每1mL分別含30mg、30mg、20mg的混合溶液;或精密稱取已標(biāo)示槲皮素、山奈素、異鼠李素含量的銀杏葉對照提取物35mg,照供試品溶液的制備方法,同法制成對照提取物溶液。 3. 供試品溶液的制備 取本品約35mg,精密稱定,加甲醇-25%鹽酸溶液(4:1)的混合溶液25mL,置水浴中加熱回流30分鐘,迅速冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,續(xù)濾液作為供試品溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取對照品溶液(或?qū)φ仗崛∥锶芤?和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定槲皮素、山奈素和異鼠李素的峰面積,計算出其含量。 |
參考文獻: |
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,一部,p281。 |