六味地黃丸-沒食子酸/澤瀉醇A乙酸酯/番木鱉苷/莫羅苷/羥基芍藥苷/梓醇/苯甲酰羥基芍藥

本方法采用高效液相色譜法/電噴霧電離-質(zhì)譜分析對六味地黃丸中沒食子酸/澤瀉醇Ａ乙酸酯/番木鱉苷/莫羅苷/羥基芍藥苷/梓醇/苯甲酰羥基芍藥苷/澤瀉醇Ｂ/熊果酸進(jìn)行了定性分析。

本方法適用于中成藥六味地黃丸。

供試品粉碎，加入95%乙醇超聲波提取過濾。用高效液相色譜儀/電噴霧電離-質(zhì)譜分析，通過二級質(zhì)譜識別六味地黃丸中的九種化學(xué)成分，沒食子酸/澤瀉醇Ａ乙酸酯/番木鱉苷/莫羅苷/羥基芍藥苷/梓醇/苯甲酰羥基芍藥苷/澤瀉醇Ｂ/熊果酸。。

1. 乙腈（HPLC級)

2. 95%乙醇（分析純)

3. 超純水

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀及工作站

1.3 二極管陣列檢測器

1.4 色譜柱：Zorbax SB-C₁₈柱（250mm×5.6mm，5μm)

1.5超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1流動相：其中溶劑A為乙腈，溶劑B為水，梯度洗脫，

程序為5%A(保持5 min) ®10 min 30%Ａ®15 min50%Ａ®10 min90%(保持20 min)，流速1.0ml/min。

2.2二極管陣列檢測器設(shè)定檢測波長：254nm

2.3進(jìn)樣量：自動進(jìn)樣10μL

2.4 質(zhì)譜條件的：ESI離子源，負(fù)離子檢出模式；霧化氣N₂，壓力68.948kPa(10psi)；干燥氣N₂，流速10L/min；掃描范圍100－1200u。

供試品溶液的制備

取六味地黃丸粉碎，稱取粉末3 g，加入95%乙醇約50mL，超聲波振蕩提取3次，每次15 min，合并提取液，過濾。將濾液減壓濃縮，用95%乙醇定容至50 mL，定容后用0 45μm微孔濾膜過濾，濾液作為HPLC-MS分析樣品。

取供試品溶液，自動進(jìn)樣10μL，梯度洗脫，運(yùn)行時間60分鐘，進(jìn)行高效液相色譜/電噴霧電離-質(zhì)譜檢測，二極管陣列檢測器設(shè)定波長254nm，對樣品進(jìn)行全掃描，并對質(zhì)量范圍100－1200u的離子進(jìn)行強(qiáng)度相加，從而獲得樣品總離子流色譜圖，采用負(fù)離子檢出模式對六味地黃丸中沒食子酸/澤瀉醇Ａ乙酸酯/番木鱉苷/莫羅苷/羥基芍藥苷/梓醇/苯甲酰羥基芍藥苷/澤瀉醇Ｂ/熊果酸進(jìn)行了定性分析。

趙新峰，孫毓慶，六味地黃丸的高效液相色譜/電噴霧電離－質(zhì)譜分析，色譜，2003，21（.5)：500～502。