吳紹輝、譚曉梅、羅佳波等. 高效液相色譜法測定葛根芩連微丸中葛根素的含量. 中國實驗

本方法采用高效液相色譜法測定葛根芩連微丸中鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀的含量。

本方法適用于葛根芩連微丸中鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀的含量測定。

供試品加入甲醇超聲提取，濾過，濾液進入中性氧化鋁柱，洗脫液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測小檗堿、巴馬汀的吸收值，計算出其含量。

1. 0.2％三乙胺溶液

2. 乙腈

3. 0.02％磷酸二氫鉀溶液

4. 0.01％十二烷基磺酸鈉溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

YWG－C₁₈柱（300 × 4.6mm, 10μm)

1.3 紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：

(0.2％三乙胺/0.02％磷酸二氫鉀/0.01％ 二烷基磺酸鈉) 乙腈 ＝ 55 ＋ 45

2.2 檢測波長：345nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品細粉（過五號篩-80目)約2g。

2. 對照品溶液的制備

分別精密稱取在105°C干燥至恒重的鹽酸小檗堿對照品10mg、鹽酸巴馬汀對照品5mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1mL置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品于三角燒瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲提取30分鐘，放冷，用甲醇補足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置已處理好的中性氧化鋁柱(玻璃柱內(nèi)徑10mm，中性氧化鋁5g，濕法裝柱，用30mL乙醇預洗)上，用乙醇30mL洗脫，收集洗脫液，置50mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1.標準曲線繪制

精密吸取對照品溶液6、8、10、14、16、20μL，進入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定小檗堿、巴馬汀的吸收值，以峰面積積分值對對照品溶液進樣量繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定小檗堿、巴馬汀的吸收值，計算出其含量。

朱斌. 葛根芩連微丸中小檗堿、巴馬汀的含量測定. 中藥材，2000，23（10)：641-642.