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1.2 儀器 WZ50C2型單道微量注射泵：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。OneTouchR Ultra血糖儀、試紙：強生(上海)醫(yī)療器材有限公司。
1.3 動物 Wistar大鼠，SPF級，體重300～400g，32只，雄性，由中國科學(xué)院上海實驗動物中心/上海斯萊克實驗動物有限公司提供，動物質(zhì)量合格證：SCXK(滬)20020010。自來水過濾滅菌，置于高壓滅菌的飲水瓶中自由飲用，滅菌大鼠全價營養(yǎng)顆粒飼料，自由采食。
2 實驗方法
2.1 分組、給藥 Wistar大鼠32只，隨機分為正常對照組、高劑量降濁合劑組、低劑量降濁合劑組和羅格列酮組各8只，各組體重無顯著性差異。各組灌予相應(yīng)的藥物7天：空白對照組予生理鹽水10ml/(kg·d)，陽性對照組(羅格列酮20mg/(kg·d)、高劑量降濁合劑組(降濁合劑濃縮液 20ml/kg·d)、低劑量降濁合劑組(降濁合劑濃縮液10ml/(kg·d)
2.2 穩(wěn)態(tài)血糖(BG)和葡萄糖輸注速率(GIR) 末次給藥前禁食不禁水4～6h，給藥30min后，大鼠腹腔麻醉。仰位固定于大鼠固定板上，切開頸部正中皮膚。分離右側(cè)頸外靜脈，結(jié)扎遠心端，用眼科剪作切口，向近心端插入連接三通旋塞的插管(插管中預(yù)先注入80u/ml肝素生理鹽水溶液)。用眼科鑷夾住靜脈壁和插管，向前行進0.5cm，結(jié)扎固定插管。分離左側(cè)頸總動脈，結(jié)扎遠心端，用小動脈夾夾住近心端，用眼科剪作切口，往近心端反向插入連接1ml針筒的插管(插管中預(yù)先注入50μ/ml肝素生理鹽水溶液)。放開小動脈夾，用眼科鑷夾住動脈壁和插管，向前行進0.5cm，結(jié)扎固定插管。頸靜脈注射50μl/ml肝素0.1ml/100g作預(yù)防抗凝。三通旋塞龔文波，等: 正糖鉗技術(shù)觀察降濁合劑對大鼠胰島素敏感性的影響的一個進口連接胰島素輸注微量泵另一個進口連接20%葡萄糖輸注微量泵，避免管腔中出現(xiàn)氣泡。待插管手術(shù)和輸注裝置安裝完畢后，開始實驗。用1ml針筒從右頸動脈取血0.5ml，用手術(shù)鉗夾住插管，用OneTouchR Ultra血糖儀和試紙測定基礎(chǔ)血糖約需5μl，放開手術(shù)鉗，將剩余血再注回頸總動脈，插管頭上加50ul肝素生理鹽水溶液。胰島素以速率為0.6ml/h(10μl/min)恒速輸注，胰島素輸注10min后，以上述同樣方法取右頸動脈血測血糖值，如血糖低于基礎(chǔ)值，則開始輸注20%葡萄糖，每隔10min取血，測定血糖。根據(jù)血糖值不斷調(diào)整葡萄糖輸注速率，使血糖維持在5mmol/L上下，一般60min左右可達穩(wěn)態(tài)。達穩(wěn)態(tài)后，每5min取血測血糖，記錄穩(wěn)態(tài)下6～8次葡萄糖輸注速率的平均值作為穩(wěn)態(tài)葡萄糖輸注速率(GIR)，取穩(wěn)態(tài)下6次血糖的平均值作為穩(wěn)態(tài)下的血糖(BG)醫(yī).學(xué).全.在.線www.gydjdsj.org.cn。
2.3 統(tǒng)計方法 所有數(shù)據(jù)均采用平均值±標準差(x±s)，計量資料兩組間比較應(yīng)用t檢驗，多組間比較采用方差分析。統(tǒng)計軟件為spss for windows10.0。
3 實驗結(jié)果
圖1 各組大鼠GIR時間變化過程3.1 各組大鼠GIR時間變化過程 如圖1，各組大鼠以速率為0.6ml/h(10μl/min)恒速輸注胰島素，空白對照組GIR迅速下降，60min時葡萄糖輸注速率(GIR)均值降低至0.13ml/h，120min時降至0.06ml/h。高、低劑量降濁合劑組和陽性對照組大鼠GIR分別達到1.21ml/h、1.04ml/h和1.59ml/h后開始下降，最低值分別為0.89ml/h、0.59ml/h和1.35ml/h，100min后回升至初始值，并有繼續(xù)上升的趨勢。
3.2 各組大鼠間BG、穩(wěn)態(tài)GIR的比較 高、低劑量降濁合劑組和羅格列酮組大鼠在70～110min穩(wěn)態(tài)血糖(BG)的平均值顯著降低，穩(wěn)態(tài)下的葡萄糖輸注速率(GIR)顯著升高(P<0.01)。高、低劑量降濁合劑組GIR均值顯著低于羅格列酮組。見表1。表1 各組大鼠正糖鉗試驗穩(wěn)態(tài)下(70～110min)與正常對照組比較，^P<0.01;與羅格列酮組比較，△P<0.05
