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生物化學-授課教案:實驗教案

生物化學:授課教案 實驗教案:皖南醫(yī)學院教案首頁授課時間:2007.12.24~2008.1.11 教案完成時間:2007.12.22 授課名稱: 分子生物學 2006年級藥學 授課時間 07.12.31~08.1.28 學時 3 授課教師 孫玲玲 專業(yè)技術(shù)職務(wù) 副教授 教學班學生數(shù) 30人

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2007.12.24~2008.1.11 教案完成時間:2007.12.22

授課名稱:

分子生物學

2006年級藥學

授課時間

07.12.31~08.1.28

學時

3

授課教師

孫玲玲

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

副教授

教學班學生數(shù)

30人

教學目的

及任務(wù)

了解質(zhì)粒的特性及其在分子生物學研究中的應(yīng)用;掌握質(zhì)粒DNA抽提的基本原理;

熟悉堿法抽提質(zhì)粒 DNA的基本方法 。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

大腸桿菌感受態(tài)細胞制備及轉(zhuǎn)化

一、講解(20分鐘)

實驗原理

1、 質(zhì)粒的特性及其在分子生物學研究中的應(yīng)用。

2、 質(zhì)粒DNA提取的基本原理。

3、 堿法提取質(zhì)粒DNA的基本方法

實驗操作及注意事項

 

二、學生操作(130分鐘)

本單元重點

質(zhì)粒DNA抽提的基本原理;堿法抽提質(zhì)粒 DNA的基本方法 。

本單元難點

提取質(zhì)粒DNA時防止大腸桿菌DNA的混入

教學方法及準備

學生動手為主;教師講授指導(dǎo)為輔

所用教材

畢富勇主編《生物化學及分子生物學實驗教程》安徽科技出版社

參考資料

《分子生物學技術(shù)》《醫(yī)學細胞及分子生物學》

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質(zhì)粒主要發(fā)現(xiàn)于細菌、放線菌和真菌細胞中,它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。

從細菌中分離質(zhì)粒DNA的方法都包括3個基本步驟:培養(yǎng)細菌使質(zhì)粒擴增;收集和裂解細胞;分離和純化質(zhì)粒DNA。本實驗采用堿法從大腸桿菌中抽提質(zhì)粒DNA,基本原理是細菌培養(yǎng)物加入SDS和NaOH溶液處理后,菌體裂解,可使細菌的質(zhì)粒DNA、染色體DNA和RNA一起從細胞中釋放出來。細菌DNA比質(zhì)粒DNA大得多,易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成大小不同的片段。共價閉環(huán)質(zhì)粒以超螺旋形式存在,除了超螺旋外,還會產(chǎn)生其它形式的DNA,當提取的質(zhì)粒電泳時,同一質(zhì)粒DNA其超螺旋形式的泳動速度比開環(huán)和線狀分子的泳動速度快。

 
復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1.何為質(zhì)粒,有何特點?

2. 溶液I、溶液II、溶液III在質(zhì)粒抽提中各有何作用?

3. 加入溶液I、溶液II、溶液III后的混勻方式有何不同,為什么?

教 學 效 果

與 分 析

質(zhì)粒是小分子DNA,提取過程要注意混入大腸桿菌DNA及RNA。操作過程要注意加入溶液I、溶液II、溶液III的不同混勻方式并加入RNA酶。大多數(shù)小組均可看到帶有光澤的白色沉淀,結(jié)果是否理想,有待下次瓊脂糖凝膠電泳檢測。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2008.11.3-2008.11.7   教案完成時間:2008.10.18  

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)1,9班

授課時間

11.3-11.7

學時

4

授課教師

吳明彩

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

講師

教學班學生數(shù)

30×3

教學目的

及任務(wù)

掌握紙層析法鑒定轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨基作用的原理,掌握紙層析的基本技術(shù)。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

實驗四  紙層析鑒定轉(zhuǎn)氨基作用

一. 講解部分   25分鐘

   復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容(5分鐘)、介紹本次實驗原理(10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項(10分鐘)

二.

 
學生實驗操作部分 135分鐘

 

本單元重點

1. 肝臟的谷丙轉(zhuǎn)氨酶作用機制

2. 利用紙層析技術(shù)證明轉(zhuǎn)氨基作用。

本單元難點

利用紙層析技術(shù)證明轉(zhuǎn)氨基作用。

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

轉(zhuǎn)氨基作用廣泛的存在于機體各組織器官中,是體內(nèi)氨基酸代謝的重要途徑。每種轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)均由專一的轉(zhuǎn)氨酶催化,此酶催化氨基酸的α-氨基轉(zhuǎn)移到另一α-酮酸上。各種轉(zhuǎn)氨酶的活性不同,其中肝臟的谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性較高,它催化的反應(yīng)為:

α-酮戊二酸+丙氨酸 谷氨酸+丙酮酸

本實驗以丙氨酸和α-酮戊二酸為底物,加肝勻漿保溫后,用紙層析法證明轉(zhuǎn)氨基作用。

紙層析屬于分配層析。以濾紙為支持物,濾紙纖維與水親合力強,能吸收20-22%的水,而且其中6-7%的水是以氫鍵形式與纖維素的羥基結(jié)合,在一般情況下很難脫去;而濾紙纖維與有機溶劑的親合力甚弱。所以紙層析是以濾紙纖維結(jié)合水為固定相,以有機溶劑作為流動相。在用紙層析法分離氨基酸時,由于各種氨基酸在此二相中的分配系數(shù)不同,各有一定的遷移率。極性弱的氨基酸易溶于有機溶劑,即分配系數(shù)小,隨流動相移動較快;而極性強的氨基酸正相反,以次分離氨基酸。強調(diào)紙層析操作流程中關(guān)鍵操作步驟,培養(yǎng)學生良好的實驗習慣。

 
復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1轉(zhuǎn)氨基作用

2 層析

教 學 效 果

與 分 析

  通過本次實驗,進一步鍛煉了學生的生化操作,并且使學生掌握紙層析法鑒定轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨基作用的原理,掌握紙層析的基本技術(shù),注意實驗操作中細節(jié)問題,讓學生認識到實驗中認真操作的重要性。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2008.10.27---2008.10.31    教案完成時間:2008.10.20

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)1,9班

授課時間

08.10.27-08.10.31

學時

4

授課教師

吳明彩

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

講師

教學班學生數(shù)

30×3

教學目的

及任務(wù)

掌握溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應(yīng)影響的機理。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

  實驗三  溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應(yīng)的影響

一. 講解部分  25分鐘

  復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容(5分鐘)、介紹本次實驗原理(10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項(10分鐘)

二. 學生實驗操作部分 135分鐘

 

本單元重點

溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應(yīng)影響的機理。

本單元難點

淀粉水解程度的控制

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

在一定溫度范圍內(nèi),溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快,反之降低。當溫度上升到某一定值時,酶活性最高,此溫度稱為該酶的最適溫度。高于此溫度,反應(yīng)速度將會下降;過高溫度會使酶蛋白變性而失活。酶促反應(yīng)對于環(huán)境酸堿度的變化非常敏感,能使酶發(fā)揮最大活性的溶液pH,稱為該酶的最適pH。環(huán)境pH的升高或降低都會降低酶的活力。酶的活性可受某些物質(zhì)的影響,能夠使酶活性增強的物質(zhì),稱為酶的激活劑;能夠使酶活性降低的物質(zhì),稱為酶的抑制劑。

本實驗以唾液淀粉酶為例,在不同溫度或酸堿度下,檢測同一時間內(nèi)淀粉水解的程度。通過淀粉與碘反應(yīng)產(chǎn)生不同的顏色,可以了解溫度、pH、激活劑與抑制劑對酶促反應(yīng)的影響。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1.淀粉逐步水解的各級產(chǎn)物與碘液反應(yīng)各呈現(xiàn)什么顏色

2. 溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應(yīng)影響的機理。

教 學 效 果

與 分 析

  通過本次實驗,進一步鍛煉了學生的生化操作,并且使學生認識到定性實驗與定量實驗的區(qū)別,掌握溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應(yīng)影響的機理,加深了對酶促反應(yīng)影響因素理論的理解。

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授課時間:2008.11.11-2008.11.15   教案完成時間:2008.11.8  

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)1,9班

授課時間

2008.11.11-15

學時

4

授課教師

吳明彩

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

講師

教學班學生數(shù)

30×3

教學目的

及任務(wù)

掌握酮體生成和利用的基本過程,通過實驗掌握酮體在肝內(nèi)生成和肝外利用。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

實驗五  酮體的生成與利用

一. 講解部分   25分鐘

   復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容(5分鐘)、介紹本次實驗原理(10分鐘)、實驗中的注意事項(10分鐘)

二. 示教部分   5分鐘

  示范小白鼠的處死方法(5分鐘)

 
三. 學生實驗操作部分 130分鐘

 

本單元重點

3. 掌握酮體生成的部位和關(guān)鍵酶

4. 掌握酮體利用的部位和肝不能利用酮體的原因

本單元難點

小白鼠處死及肝臟和肌肉的分離

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

酮體是乙酰輔酶A在肝內(nèi)肝內(nèi)代謝所產(chǎn)生的一種特有的中間代謝產(chǎn)物,肝內(nèi)只能產(chǎn)生酮體不能利用酮體。本實驗主要是驗證這一理論。

本次實驗需要處死小白鼠,取肝臟和肌肉,因而著重強調(diào)實驗中對動物的處理方法,注意培養(yǎng)學生的動手能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、研缽、試管等的使用方法,糾正學生的不良操作習慣,培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1酮體的概念和酮體生成的生理意義。

教 學 效 果

與 分 析

 

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2006.10.22---2007.1.6     教案完成時間:2007.10.15

授課名稱:

生化實驗

護理

06年級 臨床專業(yè)(本科)2班

授課時間

2007.6

學時

3

授課教師

李璐

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

講師

教學班學生數(shù)

30×3

教學目的

及任務(wù)

1.了解并掌握酵母細胞RNA提取及地衣酚顯色反應(yīng)

2.掌握離心機的使用

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

  實驗六   酵母細胞核酸的提取和定量

一. 實驗原理   20min

二. 實驗步驟   20min

三. 儀器介紹(離心機等) 10min

四. 學生實驗操作部分 120min

 

本單元重點

細胞RNA的提取

本單元難點

地衣酚顯色反應(yīng)原理

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學劑分子生物學實驗教程》安徽科技出版社

參考資料

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

本次實驗是比較具有綜合性的一次實驗,這次實驗對以前講解的玻璃儀器的操作、分光光度計的原理和使用等做了復(fù)習,使學生對其有了更深刻的掌握。另外,本次實驗還首次介紹了離心機的使用。此次實驗是涉及核酸提取的實驗,因此可以看做普通生化實驗和分子生物學的銜接,可對學生以后的學習打下基礎(chǔ)。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1.本次實驗提取核酸的主要原理是什么?

2.地衣酚顯色的原理是什么?

教 學 效 果

與 分 析

  通過實驗,學生掌握了基本的生物化學實驗的操作,能自己熟練操作分光光度計、離心機等一些常規(guī)儀器。掌握了核酸提取、地衣酚顯色等的原理和操作。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2007.10.22-2008.1.4     教案完成時間:2007.11.20  

授課名稱:

生物化學

實驗

2006年級臨床專業(yè)5,11,17班;2006年級法醫(yī)專業(yè)2班

授課時間

2007.12.3-14

學時

3

授課教師

張亞莉

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

助教

教學班學生數(shù)

30×4

教學目的

及任務(wù)

掌握谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定的原理及方法;

掌握醋酸纖維素薄膜電泳的操作方法;

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

實驗 三  血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定

  血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳

一. 講解部分  30分鐘

   復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容(5分鐘)、介紹本次實驗原理(15分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項(10分鐘)

二.

 
學生實驗操作部分 120分鐘

 

本單元重點

5. 對谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定原理的理解

6. 醋酸纖維素薄膜電泳方法的掌握

本單元難點

理解谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定實驗中為什么第二次加入底物

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

本次實驗有兩個小實驗組成。第一個實驗谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GTP)活力的測定,通過用標準曲線法求得一定時間內(nèi)在GTP的催化下,產(chǎn)物的生成量來完成。標準曲線法同學在第二次實驗中已經(jīng)掌握,本次重點放在對實驗方案的特殊設(shè)計上。第二個實驗醋酸纖維素薄膜電泳分離血清中的蛋白,鑒于學生第一次接觸依靠電泳技術(shù)分離物質(zhì),對實驗原理及具體操作過程作重點介紹,并且對實驗重要環(huán)節(jié)做演示。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1、復(fù)習谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化的丙氨酸和酮戊二酸之間的轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)

2、復(fù)習電泳分離物質(zhì)的原理

3、思考谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定實驗中為什么第二次加入底物?

教 學 效 果

與 分 析

  通過原理講解和實驗演示,并且在學生操作過程中及時指導(dǎo),本次實驗取得良好結(jié)果。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2007.12.24~2008.1.11     教案完成時間:2007.12.22

授課名稱:

分子生物學

2006年級藥學

授課時間

2007.12-24~28

學時

3

授課教師

孫玲玲

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

副教授

教學班學生數(shù)

30人

教學目的

及任務(wù)

1.了解轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學研究中的意義。
2.掌握氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞的方法。
3.掌握將外源質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)入受體菌細胞并篩選轉(zhuǎn)化體的方法。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

大腸桿菌感受態(tài)細胞制備及轉(zhuǎn)化(50分鐘*3)

 

一、講解(20分鐘)

實驗原理

1、 感受態(tài)細胞的概念

2、 轉(zhuǎn)化的概念及原理

3、 感受態(tài)細胞制備及轉(zhuǎn)化中的影響因

實驗操作及注意事項

 

二、學生操作(130分鐘)

本單元重點

氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞的方法。
將外源質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)入受體菌細胞并篩選轉(zhuǎn)化體的方法。

本單元難點

防止雜菌和其它外源 DNA 的污染

教學方法及準備

學生動手為主;教師講授為輔

所用教材

畢富勇主編《生物化學及分子生物學實驗教程》安徽科技出版社

參考資料

《分子生物學技術(shù)》《醫(yī)學細胞及分子生物學》

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

重組DNA分子體外構(gòu)建完成后,必須導(dǎo)入特定的宿主(受體)細胞,使之無性繁殖并高效表達外源基因或直接改變其遺傳性狀,這個導(dǎo)入過程及操作統(tǒng)稱為重組DNA分子的轉(zhuǎn)化。所謂的感受態(tài),即指受體(或者宿主)最易接受外源DNA片段并實現(xiàn)其轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài),它是由受體菌的遺傳性狀所決定的,同時也受菌齡、外界環(huán)境因子的影響。cAMP可以使感受態(tài)水平提高一萬倍,而Ca2 也可大大促進轉(zhuǎn)化的作用。細胞的感受態(tài)一般出現(xiàn)在對數(shù)生長期,新鮮幼嫩的細胞是制備感受態(tài)細胞和進行成功轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵。大腸桿菌的轉(zhuǎn)化常用化學法(CaCl2法),該法最先是由Cohen于1972年發(fā)現(xiàn)的。其原理是細菌處于0℃,CaCl2的低滲溶液中,菌細胞膨脹成球形,轉(zhuǎn)化混合物中的DNA形成抗DNase的羥基-鈣磷酸復(fù)合物粘附于細胞表面,經(jīng)42℃短時間熱沖擊處理,促使細胞吸收DNA復(fù)合物,在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時后,球狀細胞復(fù)原并分裂增值,被轉(zhuǎn)化的細菌中,重組子中基因得到表達,在選擇性培養(yǎng)基平板上,可選出所需的轉(zhuǎn)化子。

 
復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1. 影響轉(zhuǎn)化率的因素

2. 除化學法轉(zhuǎn)化細菌外,還有其他哪些常用轉(zhuǎn)化法,

教 學 效 果

與 分 析

整個操作均需在冰上進行,不能離開冰浴,否則細胞轉(zhuǎn)化率將會降低。而學生人數(shù)比較多,條件限制,有些小組結(jié)果不容樂觀。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2008.11.18---2008.11.22      教案完成時間:2008.11.10

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)20班

授課時間

2008.11.18---2008.11.22

學時

4

授課教師

張玲

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

助教

教學班學生數(shù)

30

教學目的

及任務(wù)

掌握肝糖原合成和分解代謝的基本過程,通過實驗掌握食物對肝糖原含量的影響。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

實驗六   饑餓和飽食對肝糖原含量的影響

一. 講解部分   25分鐘

  總結(jié)上次實驗及實驗報告中出現(xiàn)的問題(5分鐘)、復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容

(5分鐘)、介紹本次實驗原理(10分鐘)、實驗中的注意事項(5分鐘)

二. 示教部分   5分鐘

  示范小白鼠的處死方法(5分鐘)

 
三. 學生實驗操作部分 120分鐘

 

本單元重點

7. 掌握動物實驗的特點

8. 掌握分光光度計的使用

本單元難點

小白鼠處死及肝臟的分離

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

上次實驗中,部分學生對分光光度法的原理理解不透徹,操作不熟練,這次實驗需再次強調(diào)分光光度計的原理及使用。本次實驗是動物實驗,因而著重強調(diào)實驗中對動物的處理方法,注意培養(yǎng)學生的動手能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、研缽、試管等的使用方法,糾正學生的不良操作習慣,培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。對動物的處理及分光光度計的使用是本次實驗的重點,要求學生能熟練掌握。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1.肝糖原的含量受哪些因素的影響?

2.饑餓和飽食狀態(tài)對肝糖原分別產(chǎn)生什么樣的影響,請解釋原因。

教 學 效 果

與 分 析

  通過實驗,學生進一步熟悉了分光光度計的原理和使用方法,能自己熟練操作分光光度計。同時亦進一步熟悉了小白鼠的處死及肝臟分離方法,掌握了糖原含量測定的基本原理,加深了對理論課內(nèi)容的理解。

皖南醫(yī)學院教案首頁

 

授課時間:2008.10.13---2008.10.17    教案完成時間:2008.10.10

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)20班

授課時間

08.10.13-08.10.17

學時

4

授課教師

張玲

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

教學班學生數(shù)

30

教學目的

及任務(wù)

1.了解實驗室規(guī)章制度

2執(zhí)業(yè)護士網(wǎng).掌握一些常用儀器的使用

3.掌握蛋白質(zhì)含量測定的基本實驗原理和方法

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

  實驗一   Lowry氏酚試劑比色法測蛋白質(zhì)含量

一. 講解部分   35min

  強調(diào)實驗室規(guī)章制度(5min)、常用儀器的使用(15min)、本次實驗原理(10min)、實驗中的注意事項(5min)

二. 學生實驗操作部分 125min

 

本單元重點

9. 對比色法測物質(zhì)含量原理的理解

10.   對分光光度計的使用

本單元難點

分光光度計的原理和使用方法

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

本次實驗是生化第一次實驗,因而要強調(diào)整個階段的實驗室規(guī)章制度以及實驗報告的書寫和實驗課堂的紀律。對于常用實驗儀器,如吸管、容量瓶、試管等的使用,應(yīng)盡量詳細講解,使學生打下基礎(chǔ),以便后面的實驗操作的規(guī)范進行。分光光度計的原理和使用是本次實驗的重點,并也貫穿整個生化實驗的操作,所以要求學生能熟練掌握。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1.比色法測物質(zhì)含量時有幾種求解方法?

2.Lowry酚試劑法測蛋白含量的原理。

教 學 效 果

與 分 析

  通過實驗,學生以基本掌握了分光光度計的原理和使用方法,能自己熟練操作分光光度計。掌握了酚試劑法測蛋白含量的原理,加深了對蛋白質(zhì)理論的理解。

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授課時間:2008.10.20-2008.10.24     教案完成時間:2008.10.18  

授課名稱:

生物化學

實驗

2007年級臨床專業(yè)1,9班

授課時間

10.20-10.24

學時

4

授課教師

吳明彩

專業(yè)技術(shù)職務(wù)

講師

教學班學生數(shù)

30×3

教學目的

及任務(wù)

掌握堿性磷酸酶的km值的測定方法,通過實驗掌握雙倒數(shù)作圖來計算出堿性磷酸酶的km值。

教學內(nèi)容、步驟及時間分配:

實驗二  堿性磷酸酶(AKP)的km值的測定

一. 講解部分   25分鐘

   復(fù)習理論課相關(guān)內(nèi)容(5分鐘)、介紹本次實驗原理(10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項(10分鐘)

二.

 
學生實驗操作部分 135分鐘

 

本單元重點

11.   對雙倒數(shù)作圖來計算出堿性磷酸酶的km值原理的理解

12.   掌握堿性磷酸酶的km值的測定方法

本單元難點

用雙倒數(shù)作圖計算堿性磷酸酶的km值

教學方法及準備

板書講授+課堂演示;板書

所用教材

《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術(shù)出版社

參考資料

《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社

教研室審閱意見

(教案末頁)

小 結(jié)

米氏方程km值是酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時的底物濃度,是酶的特征性常數(shù)。用雙倒數(shù)作圖是求得某一酶的km值的常用方法。

本次實驗以AKP為例,測定其于不同底物濃度下的反應(yīng)初速度,通過雙倒數(shù)作圖,測定并最終計算出酶的km值。因而著重強調(diào)實驗中對刻度吸管使用的準確性高,注意培養(yǎng)學生的動手和分析能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、試管等的使用方法,糾正學生的不良操作習慣,培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。

 
 

復(fù)習思考題

作 業(yè) 題

1復(fù)習米氏方程的推導(dǎo)。

教 學 效 果

與 分 析

  通過本次實驗,進一步鍛煉了學生的生化操作,并且使學生認識到定量實驗與定性實驗的區(qū)別,了解定量實驗對數(shù)據(jù)精確性的要求,在數(shù)據(jù)的處理上,使學生練習了作圖法求所需量的方法。

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