2017年執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》考試章節(jié)知識點(diǎn)(14)

2017年執(zhí)業(yè)藥師藥物分析章節(jié)知識點(diǎn)（14)

　　第六章 色譜法
 
　　色譜法是一種物理或物理化學(xué)分離分析方法。先將混合物中各組分分離而后逐個分析，是分析混合物最有力的手段。具有高靈敏度、高選擇性、高效能、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。
 
　　色譜過程是物質(zhì)分子在相對運(yùn)動的兩相(固定相和流動相)間分配平衡的過程，可用分配系數(shù)K和容量因子k描述。
 
　　例題：色譜過程使物質(zhì)分子在; A.溶液中達(dá)到平衡的過程B. 兩相中平衡的過程C. 固定相中分配的過程 D. 流動相中溶解的過程
 
　　E. 相對運(yùn)動的兩相(流動相與固定相)間分配平衡的過程 答案: E
 
　　1.分配系數(shù)K=Cs/Cm，與組分、固定相和流動相性質(zhì)和溫度有關(guān)。
 
　　2.容量因子k=Ws/Wm，不僅與組分、固定相和流動相性質(zhì)和溫度有關(guān)，還與兩相體積有關(guān)。容量因子不等是色譜分離的先決條件。
 
　　3.色譜過程方程：保留時間與分配系數(shù)關(guān)系tR=t0(1+k)
 
　　第一節(jié) 薄層色譜法
 
　　掌握薄層色譜法的基本原理、操作方法以及在藥物鑒別、檢查中的應(yīng)用。
 
　　一、基本原理
 
　　1.吸附薄層色譜：吸附劑對不同組分A和B具有不同吸附能力，展開劑也對A和B有不同溶解、解吸能力，當(dāng)展開劑不斷展開， A、B在吸附劑和展開劑之間連續(xù)不斷吸附解吸，產(chǎn)生差速遷移得到分離。
 
　　2.比移值：Rf=l/l0，為組分遷移距離與展開劑遷移距離之比
 
　　比移值的最佳范圍是0.3～0.5，可用范圍是0.2～0.8。
 
　　影響比移值因素：①被分離物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。極性較強(qiáng)的組分Rf較小。②薄層板性質(zhì)。吸附劑活性越強(qiáng)，吸附作用就越強(qiáng)，Rf越小醫(yī)學(xué)全.在.線.提供. gydjdsj.org.cn。③展開劑性質(zhì)。極性越強(qiáng)展開劑Rf值增大④展開劑蒸氣飽和度對Rf也有較大影響。
 
　　3.分離度：R=2d/(W1+W2)，兩相鄰斑點(diǎn)中心距離與兩斑點(diǎn)平均寬度的比值
 
　　二、操作方法
 
　　1.吸附劑和展開劑的選擇
 
　　(1)吸附劑：常用有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、硅藻土等。硅膠、氧化鋁的活性與含水量有關(guān)，含水量高，活性低，吸附力弱;聚酰胺表面的酰胺基可形成氫鍵，選擇性高。
 
　　(2)展開劑：極性較強(qiáng)的展開劑適用于極性較強(qiáng)組分的洗脫;極性較弱的展開劑適用于極性較弱組分的洗脫。加入少量酸、堿可以使極性物質(zhì)斑點(diǎn)集中，減少拖尾，提高分離度。
 
　　選擇一般原則是，分離極性較強(qiáng)組分時選用活性低的薄層板，以極性強(qiáng)的展開劑展開。分離弱極性組分時，宜選用活性高的薄層板，以極性弱的展開劑展開。調(diào)整待測組分Rf0.3～0.5范圍內(nèi)。
 
　　2.薄層板制備：1份固定相與3份水混和涂布，110℃烘30分鐘。
 
　　3.點(diǎn)樣與展開：點(diǎn)樣一般為直徑2～4mm圓點(diǎn)，距底2.0cm;展開距離一般為10～15cm。
 
　　4.斑點(diǎn)定位：有色可直接觀察;有熒光在紫外燈下觀察;噴灑顯色劑使組分顯色。
 
　　三、應(yīng)用 1.鑒別：比較供試品與對照品溶液的比移值 2.雜質(zhì)檢查：雜質(zhì)對照品比較法;高低濃度對比法

　　第二節(jié) 氣相色譜法和高效液相色譜法
 
　　掌握氣相色譜法和高效液相色譜法的基本原理;色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的主要內(nèi)容;氣相色譜法和高效液相色譜法在藥物鑒別、檢查和含量測定中的應(yīng)用。了解氣相色譜儀和高效液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)。
 
　　一、氣相色譜法： 以氣體為流動相的色譜法，具有分離效能高、靈敏度高、樣品用量少、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，不適用于難揮發(fā)和熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)分析。
 
　　(一)基本原理
 
　　1.基本概念
 
　　色譜峰參數(shù)：峰高或峰面積(用于定量)，峰位(保留值表示，用于定性)，峰寬(用于衡量柱效)
 
　　保留值：保留時間、死時間、調(diào)整保留時間
 
　　峰寬：標(biāo)準(zhǔn)差、半峰寬、峰寬
 
　　2.塔板理論：把組分在兩相間的連續(xù)轉(zhuǎn)移過程，分解為間歇的在單個塔板中的分配平衡過程
 
　　理論塔板數(shù) n=5.54(tR/Wh/2)2
 
　　色譜柱的理論塔板數(shù)越多，柱效越高;同樣長度中塔板高度越小，柱效越高。
 
　　3.速率理論：主要說明使色譜峰擴(kuò)張而降低柱效的因素
 
　　范氏方程 H=A+B/μ+Cμ
 
　　A為渦流擴(kuò)散項(xiàng)。采用適當(dāng)粒度、均勻的填料并填充均勻可減小渦流擴(kuò)散，開管毛細(xì)管柱A=0
 
　　B為縱向擴(kuò)散系數(shù)。為減小縱向擴(kuò)散可采用較高的載氣流速;或選擇分子量大的重載氣;也可降低柱溫。
 
　　C為傳質(zhì)阻抗系數(shù)。在能完全覆蓋載體表面的前提下，應(yīng)適當(dāng)減少固定液用量。
 
　　范氏方程說明填充均勻程度、載體粒度、載氣種類、載氣流速、柱溫、固定液層厚度對柱效的影響。

[1] [2] [3] 下一頁