二、中藥有效成分的分離與精制
(一)根據(jù)物質溶解度差別進行分離
1.結晶及重結晶法
利用不同溫度可引起物質溶解度改變的性質來分離物質。選擇結晶溶劑的原則是：對要結晶的成分熱時溶解度大，冷時溶解度小，對雜質冷熱都不溶或冷熱都易溶。另外要求結晶溶劑不與待結晶物質發(fā)生化學反應;沸點較低、易揮發(fā);無毒或毒性很小。
判斷結晶純度的方法。
(1)晶型均一，色澤均勻。
(2)有一定的熔點和較小的熔距，熔距應在2度以內。
(3)TLC或PC分別用三種以上溶劑系統(tǒng)檢識，同單一圓整斑點。
(4)HPLC或GC檢查呈現(xiàn)單峰。
2.沉淀法
(1)在溶液中回入另一種溶劑以改變混合的極性，使一部分物質沉淀析出。如：水提醇沉法(除去多糖或蛋白質);醇提水沉法(除去樹脂或葉綠素);醇提乙醚沉淀或丙酮沉淀法(使皂苷沉淀析出)
(2)pH法：對酸性、堿性或兩性有機化合物來說，�？赏ㄟ^加入酸、堿以調節(jié)溶液的pH值，改變分子的存在狀態(tài)(游離型或解離型)，從而改變溶解度而實現(xiàn)分離。
酸提堿沉法(使生物堿類成分沉淀)。堿提酸沉法(使黃酮、蒽醌等沉淀);等電點法(使蛋白質沉淀)
(3)鹽類沉淀法：通過加入某種沉淀試劑，使生成水不溶性的類沉淀。
(二)根據(jù)物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離
1.分配系數(shù)K
K=Cu/CL
K：表示分配系數(shù);Cu：表示溶質在上相溶劑中的濃度;CL：表示溶質在下相溶劑中的濃度。K越大越容易分離。
2.分離因子β
分離因子β可定義為A、B兩種溶質在同一溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)的比值。
β=KA/KB
β越大越容易分離。
β≧100，僅作一次簡單萃取就可實現(xiàn)基本分離;若100>β>10，則須萃取10～12次;β≧2時，要想實現(xiàn)分離，須做100次以上萃取才能完成;β≈1時，則KA≈KB，意味著兩者極其相近，即使作任意次分配也無法實現(xiàn)分離。
3.分配比與pH
對酸性、堿性及兩性有機化合物來說，都具有游離型和解離型，二者可互相轉化，故在兩相中的分配比不同。
一般而言，pH<3時，酸性物質多呈非解離狀態(tài)(HA)、堿性物質呈解離狀態(tài)(BH+)存在，PH>12時，則酸性物質呈解離狀態(tài)(A-)、堿性物質呈非解離狀態(tài)(B)存在醫(yī)學全.在.線.提供. www.gydjdsj.org.cn。
4.紙色譜
紙色譜屬于分配色譜，原理與液-液萃取法基本相同。
5.分配柱色譜
分離水溶性或極性較大的成分時，固定相多采用強極性溶劑，如水、緩沖溶液等，流動相一般選擇極性相對較小的有機溶劑，稱為正相分配色譜;反相分配色譜。
(三)根據(jù)物質的吸附性差別進行分離
1.物理吸附基本規(guī)律 — 相似者易于及附
硅膠、氧化鋁是極性吸附劑，遵循“相似者易于吸附”的經(jīng)驗規(guī)律�；钚蕴繛槭欠菢O性吸附劑，與硅膠、氧化鋁相反。
為避免發(fā)生化學吸附，酸性物質宜用硅膠，堿性物質則宜用氧化鋁進行分離。
2.極性及其強弱判斷
化合物的極性由分子中所官能團決定
3.吸附色譜法應用
4.聚酰胺
聚酰胺吸附屬于氫鍵吸附，酰胺羰基與酚類、黃酮類化合物的酚羥基，或酰胺鍵上的游離氨基與醌類、脂肪羧酸上的羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。吸附強弱則取決于各種化合物與之形成氫鍵締合的能力。
聚酰胺特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物。
(1)形成氫鍵的基團數(shù)目越多，吸附能力越強。
(2)成鍵位置對吸附力也有影響。易形成分于內氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相對減弱。
(3)分子中芳香化程度高者，則吸附性增強;反之則減弱。
一般情況下，各種溶劑在聚酸胺術上的洗脫能力由弱至強，可大致排列成下列順序：
水→甲醇→氫氧化鈉水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
