A. 大分子右旋糖酐檢查法 儀器裝置 如圖。A為內(nèi)徑1.5~1.55cm、高58cm、底部為燒結(jié)玻璃的玻璃柱,上接內(nèi)徑4.0~4.1cm、高22cm的加膠管B,B的上端連接恒壓貯液瓶C,以上各連接處均為玻璃磨砂接口,B的下端連一出水導管D,E為接受洗脫液試管。 操作方法 (1) 凝膠的浸泡 稱取葡聚糖凝膠(右旋糖酐70用G-150,右旋糖酐40用G-100)7~10g,加水200ml,在水浴中加熱5小時,時時輕輕攪拌,并趁熱反復更換凝膠的上層液,以除去其中的雜質(zhì)及過細的膠粒。 (2) 裝柱 于柱A內(nèi)加滿水,接上加膠管B,然后于充分泡脹的凝膠中加入約為凝膠容量1/4體積的水,攪拌均勻后,沿管壁裝入加膠管中,加膠管與貯液瓶C相連,用水流洗,葡聚糖凝膠G-100流速為每小時20ml,G-150流速為每小時15ml,流洗量相當于2~3個凝膠床的總體積(約200~300ml),使柱床平衡、穩(wěn)定、移去加膠管,吸去多余的凝膠,使凝膠高度達50cm。 (3) 加樣 加樣前小心吸去凝膠面上的液體,并用出水導管使膠面液體流完,立即按各藥品項下的規(guī)定量,分兩次緩緩加入供試品溶液,開始收集并計量,待供試品溶液完全滲入膠面后,用水約2ml分兩次沖洗管壁,然后緩緩加水至膠面并與貯液瓶相連, 調(diào)節(jié)流速,葡聚糖凝膠G-100每小時約20ml,G-150每小時約15ml,在一定的壓力下進行洗脫。 (4) 洗脫 加樣后,待收集的洗脫液為凝膠總體積1/4左右時,開始分段收集,每管約3ml,照旋光度測定法(附錄Ⅵ E),分別測定右旋糖酐含量,當合并洗脫液中右旋糖酐的含量為加入量的10±0.5%時,為一個級分,共收集兩個級分,準確濃縮或稀釋至10ml,供測定含量和特性粘數(shù)用。 凝膠柱繼續(xù)洗脫,直至不含右旋糖酐為止,以備下次使用。 (5) 大分子部分含量測定醫(yī)學全在線www.med126.com 取上述洗脫液,用長度0.5dm的測定管,照旋光度測定法測定(附錄Ⅵ E),測得的旋光度乘以1.0256,即為每100ml中的含量(g)。 (6) 大分子部分特性粘數(shù)測定 取上述大分子部分含量測定項下溶液,照粘度測定法(附錄Ⅵ G 第三法),自“用3號垂熔玻璃漏斗濾過”起,依法測定[η]<[1]>及[η]<[2]>,按下式計算10%大分子部分的特性粘數(shù)。
[η]<[1]>+[η]<[2]> [η]<[1]>×A<[1]>-────────────(A<[1]>-10) 2 。郐牵荩僵ぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉぉ 10
式中 [η]<[1]>為收集第一級分溶液的特性粘數(shù); [η]<[2]>為收集第二級分溶液的特性粘數(shù); A<[1]>為第一級分溶液含右旋糖酐量相當于總加入量的百分數(shù)。
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