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肝素生物檢定法,藥物分析考試輔導試題西藥分析 | |||||
| 來源：醫(yī)學全在線 更新：2007-5-17 考研論壇 | |||||
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標準品溶液的配制 精密稱取肝素標準品適量,按標示效價加滅菌水溶解使成每1ml中含100單位的溶液，分裝于適宜的容器內，4～8℃貯存，如無沉淀析出，可在3個月內使用。 標準品稀釋液的配制 試驗當日，精密量取標準品溶液，按高、中、低劑量組(ds<[3]>、ds<[2]>、ds<[1]>)用 0.9％氯化鈉溶液配成三種濃度的稀釋液，相鄰兩濃度的比值(r)應相等;調節(jié)劑量使低劑量組各管的平均凝結時間較不加肝素對照管組明顯延長。高劑量組各管的平均凝結時間，用新鮮兔血者，以不超過60分鐘為宜，其稀釋液一般可配成每1ml中含肝素2～5單位，r為1:0.7左右；用血漿者,以不超過30分鐘為宜，其稀釋液一般可配成每1ml中含肝素0.5～1.5單位，r為1∶0.85左右。 供試品溶液與稀釋液的配制 按供試品的標示量或估計效價(A<[T]>)，照標準品溶液與稀釋液的配制法配成高、中、低(dT<[3]>、dT<[2]>、 dT<[1]>)三種濃度的稀釋液。相鄰兩濃度之比值(r)應與標準品相等，供試品與標準品各劑量組的凝結時間應相近。 血漿的制備醫(yī).學全.在.線gydjdsj.org.cn 迅速收集兔或豬血置預先放有8％枸櫞酸鈉溶液的容器中,枸櫞酸鈉溶液與血液容積之比為1:19，邊收集邊輕輕振搖，混勻，迅速離心約20分鐘（離心力不超過1500×g為宜，g為重力常數(shù)）。立即分出血漿，分成若干份分裝于適宜容器內，低溫凍結貯存。臨用時置37±0.5℃水浴中融化,用兩層紗布或快速濾紙過濾，使用過程中在4～8℃放置。 檢定法 （1）新鮮兔血 取管徑均勻（0.8×3.8cm或1.0×7.5cm）、清潔干燥的小試管若干支，每管加入一種濃度的標準品或供試品稀釋液0.1ml,每種濃度不得少于3管,各濃度的試管支數(shù)相等。取剛抽出的兔血適量，分別注入小試管內，每管0.9ml,立即混勻,避免產(chǎn)生氣泡，并開始計算時間。將小試管置37±0.5℃恒溫水浴中，從動物采血時起至小試管放入恒溫水浴的時間不得超過 3分鐘，注意觀察并記錄各管的凝結時間。 �。�2）血漿 取上述規(guī)格的小試管若干支，分別加入血漿一定量，置37±0.5℃恒溫水浴中預熱5～10分鐘后，依次每管加入一種濃度的標準品或供試品稀釋液及1％氯化鈣溶液（每種濃度不得少于3管,各濃度的試管支數(shù)相等），血漿、肝素稀釋液和氯化鈣溶液的加入量分別為0.5、0.4和0.1ml（或0.8、0.1和0.1ml），加入氯化鈣溶液后，立即混勻，避免產(chǎn)生氣泡，并開始計算時間，注意觀察并記錄各管凝結時間。將各管凝結時間換算成對數(shù)，照生物檢定統(tǒng)計法（附錄Ⅹ Ⅳ）中的量反應平行線測定法計算效價及實驗誤差。 檢定法（1）的可信限率(FL％)不得大于10％。 檢定法（2）的可信限率(FL％)不得大于5％。 |
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| 文章錄入：凌云 責任編輯：凌云 | |||||
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