|
色譜法（又稱層析法）根據(jù)其分離原理可分為：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。吸附色譜法是利用被分離物質(zhì)在吸附劑上被吸附能力的不同，用溶劑或氣體洗脫使組分分離；常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。分配色譜是利用被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)的不同使組分分離；其中一相被涂布或鍵合在固體載體上，稱為固定相,另一相為液體或氣體,稱為流動相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上交換能力的不同使組分分離；常用的有不同強度的陽、陰離子交換樹脂，流動相為水或含有機溶劑的緩沖液。分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法，是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同導(dǎo)致在填料上滲透程度不同使組分分離；常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等，根據(jù)固定相和供試品的性質(zhì)選用水或有機溶劑作為流動相。
色譜法又可根據(jù)分離方法分為：紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。所用溶劑應(yīng)與供試品不起化學(xué)反應(yīng),純度要求較高。分析時的溫度,除氣相色譜法或另有規(guī)定外，系指在室溫操作。分離后各成分的檢出，應(yīng)采用各品種項下所規(guī)定的方法。采用紙色譜法、薄層色譜法或柱色譜法分離有色物質(zhì)時，可根據(jù)其色帶進(jìn)行區(qū)分，分離無色物質(zhì)時，可在短波(254nm)或長波(365nm) 紫外光燈下檢視，其中紙色譜或薄層色譜也可噴以顯色劑使之顯色，或在薄層色譜中用加有熒光物質(zhì)的薄層硅膠，采用熒光猝滅法檢視；柱色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法可用接于色譜柱出口處的各種檢測器檢測；柱色譜法還可分部收集流出液后用適宜方法測定。
... |
