2018微生物檢驗技師輔導：革蘭染色兩步法

革蘭染色兩步法在陰道分泌物涂片的臨床應用體是微生物檢驗必不可少的一項知識，檢驗人員都應該了解的，醫(yī)學全在線整理了相關內容，希望能夠幫到大家。

實驗目的

比較革蘭染色兩步法與傳統(tǒng)四步法對陰道分泌物涂片標本染色的臨床意義。 方法 收集了100例主訴外陰瘙癢和陰道病患者的陰道分泌物的標本，對其涂片分別采用二步革蘭染色兩步法和革蘭染色四步法進行染色，并對結果比較。結果 兩種染色方法的比較無顯著性差異 結論 新兩步法可以替代四步法，值得推廣應用。

陰道炎是婦科門診常見的病癥之一。醫(yī)學全在線搜集整理確診主要是依據實驗室對陰道分泌物的病原學檢查。陰道分泌物涂片染色法是常用的方法之一。但傳統(tǒng)的革蘭四步染色法，操作繁瑣，時有誤差。為進一步探索新的革蘭染色兩步法與傳統(tǒng)四步法對臨床標本染色的差異及其意義，2007年7月到11月作者收集了100例（20-55歲)主訴白帶增多，有異味，外陰瘙癢婦科門診患者陰道分泌物的標本，對其涂片分別采用新的革蘭染色二步法和傳統(tǒng)的革蘭染色四步法，并對結果進行了比較。結論兩種方法的結果比較無顯著性差異。說明臨床標本采用新型的革蘭染色兩步法的染色結果完全可以替代經典的革蘭染色四步法。

材料與方法：

1.對象

100例陰道分泌物標本均取自醫(yī)院婦科門診。檢測試劑：革蘭兩步法染色液。

2.每份標本涂片兩張，一張做新的革蘭兩步法染色，另一張做傳統(tǒng)革蘭四步法染色。革蘭氏染色兩步法

步驟：以消毒棉簽蘸取陰道后穹隆及宮頸管處的分泌物制成涂片，涂片時將拭子在玻片上稍用力滾動一周，后用95%泌物的乙醇固定，自然干燥。加入新型的革蘭染色兩步法的A液（蘭色)1-2滴使之蓋滿涂膜，染色15秒后，清水沖洗，再加入B液（紅色)1-2滴使之蓋滿涂膜，染色15秒后，清水沖洗后自然干燥，油鏡鏡檢。革蘭氏染色四步法步驟：以消毒棉簽蘸取陰道后穹隆及宮頸管處的分泌物制成涂片，涂片時將拭子在玻片上稍用力滾動一周。涂片干燥后經火焰加熱固定，加入染色液。龍膽紫液染色10秒后水洗，甩干。碘溶液染色10秒后水洗，甩干。脫色液脫色10秒后水洗，甩干。沙黃溶液復染10秒后水洗，自然干燥，油鏡鏡檢。

結果： 在念珠菌性陰道炎中，可見明顯的菌絲相，孢子相，菌絲胞子雙相的涂片染色。二步法與四步法均可見霉菌孢子呈西瓜子樣，鏡下可找到成群革蘭陽性濃染的卵圓形孢子，可見芽生孢子和假菌絲（細長而直，有分枝或者隔，呈節(jié)段狀，形狀似竹竿)兩步法的視野清晰，未見明顯雜質。在細菌陰道炎中，二步法染色可見紫藍色的棒狀乳酸桿菌大量減少，可發(fā)現(xiàn)有大量深紫色小桿菌或球狀桿菌聚集在淡紅色上皮細胞上形成其邊緣灰暗呈鋸齒狀的線索細胞。上皮細胞，漿豐富，染成淡紅色，邊緣色深，視野清晰，小桿菌及球狀桿菌染成深藍色。醫(yī)學全在線搜集整理總體來說陰道分泌物涂片四步法染色與兩步法相比基本無差異。

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