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1 發(fā)病情況: 該豬場(chǎng)位于沈陽(yáng)市郊,共存欄豬2 000多頭,11月21日,發(fā)現(xiàn)育肥豬舍中的一個(gè)圈舍的幾頭育肥豬突然發(fā)生腹瀉,獸醫(yī)人員及時(shí)投喂了抗菌藥物,但治療效果不理想,22日清晨后備母豬和妊娠母豬也出現(xiàn)腹瀉現(xiàn)象,繼而哺乳母豬、哺乳仔豬及斷奶仔豬相繼發(fā)病。在一周左右的時(shí)間里,該病幾乎傳遍整個(gè)豬場(chǎng)。育肥豬發(fā)病率較高,接近100%,但無(wú)死亡現(xiàn)象;后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬發(fā)病率占母豬的36%,無(wú)死亡發(fā)生;205頭哺乳仔豬中,發(fā)病192頭,死亡101頭,發(fā)病率93.7%,死亡率52.6%,其中10日齡以內(nèi)的仔豬67頭,死亡66頭,死亡率高達(dá)98.5%。2 癥狀及剖檢變化: 育肥豬及種豬:發(fā)病初期食欲減退,精神沉郁,體溫略有升高,很快出現(xiàn)腹瀉,育肥豬突然發(fā)生腹瀉,糞便呈灰色或褐色,帶有腥臭味,個(gè)別豬還有嘔吐現(xiàn)象。妊娠和哺乳母豬除了具有腹瀉癥狀外,有的還表現(xiàn)泌乳減少或停止。育肥豬及種豬病程較短,一周左右即恢復(fù)健康,沒(méi)有死亡發(fā)生。哺乳仔豬:多數(shù)仔豬哺乳后發(fā)生嘔吐,接著發(fā)生劇烈的水樣腹瀉,糞便為乳白色或黃綠色,帶有未消化的凝乳塊,后軀被毛被糞便污染。發(fā)病后期,由于脫水糞便黏稠,體重減輕,病豬極度消瘦,體溫下降,于發(fā)病后3~5d死亡。剖檢病死仔豬可見(jiàn)病變主要在胃和小腸。胃內(nèi)有凝乳塊,胃底部黏膜充血,特別是胃大彎部較明顯。小腸內(nèi)充滿黃綠色或灰白色液狀物,含有泡沫和未消化的凝乳塊,小腸壁變薄,腸管呈半透明狀,腸系膜淋巴結(jié)腫脹呈淡黃色。根據(jù)上述臨床癥狀和剖檢變化,我們初步診斷為豬傳染性胃腸炎并進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室診斷。3 實(shí)驗(yàn)室診斷3.1小腸絨毛檢查:剖檢死亡仔豬,取空腸縱向剪開(kāi),用生理鹽水將內(nèi)容物沖掉,在玻璃平皿內(nèi)平鋪,加少量生理鹽水,在低倍鏡下觀察,可見(jiàn)空腸絨毛明顯縮短。3.2電鏡觀察:取發(fā)病后死亡仔豬胃內(nèi)容物以及發(fā)病豬糞便等病料(死亡仔豬2份,育成豬1份),經(jīng)處理后送沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行電鏡觀察,結(jié)果在3份檢樣中均檢出冠狀病毒。3.3RTPCR檢測(cè):為了進(jìn)一步確診,采集電鏡檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的2份病死仔豬的腸系膜淋巴結(jié)、扁桃體等病料,經(jīng)常規(guī)處理后,用TRIZOLReagent細(xì)胞裂解液按常規(guī)方法提取組織總RNA,用反轉(zhuǎn)錄酶MMLV進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,用擴(kuò)增TGEV 基因部分片段的引物(上游引物: 5′CACAGCTATTACAAAGGTGACG3′;下游物:5′TGTGCAGGAATCTAGGTGTAGC3′)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件為:95℃預(yù)變性5min;94℃變性30s,55℃退火30s,72℃延伸30s,35個(gè)循環(huán);72℃延伸10min。結(jié)果從2份病料中均擴(kuò)增出650 bp左右的目的條帶,與預(yù)期片段大小相符(預(yù)期擴(kuò)增片段大小為637 bp)。進(jìn)一步證明此冠狀病毒為豬傳染性胃腸炎病毒。4 防治4.1在初步確診后,建議該場(chǎng)對(duì)豬舍加強(qiáng)消毒,保持豬舍的溫度和干燥,對(duì)發(fā)病仔豬進(jìn)行對(duì)癥治療,通過(guò)口服補(bǔ)液鹽進(jìn)行飲水補(bǔ)液(配方:1000ml水中加氯化鈉3.5 g、氯化鉀1.5g、碳酸氫鈉2.5g、葡萄糖20g),以緩解豬群脫水。4.2對(duì)發(fā)病仔豬用氟哌酸等抗菌藥物進(jìn)行治療,防止細(xì)菌繼發(fā)感染,經(jīng)過(guò)采取綜合防制措施后,病情很快得到控制。4.3為了有效控制該病在本豬場(chǎng)的發(fā)生,建議該場(chǎng)進(jìn)行TGEV疫苗免疫接種,對(duì)所有妊娠母豬在產(chǎn)前1個(gè)半月和半個(gè)月時(shí)分別用豬傳染性胃腸炎弱毒苗經(jīng)肌肉和鼻內(nèi)各接種1mL,使仔豬通過(guò)吃母乳而獲得被動(dòng)免疫保護(hù),此后該病在本豬場(chǎng)未有發(fā)生。
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