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一、采精方法采精是對家
兔人工授精的首要一環(huán)。下面就手握假陰道采精和授精方法介紹如下: 1、假陰道的制作:用直徑5厘米左右,長度8厘米左右的硬塑料管一支,把兩端銼光,內(nèi)裝與塑管內(nèi)徑相仿的軟海綿一塊,將海綿沿直軸方向打一小孔,孔徑為0.5厘米,孔口呈傘形。集精裝可用大號避孕套代替! 2、采精前的
器械準(zhǔn)備:將洗凈、消毒過的避孕套松開,裝入假陰道內(nèi)胎中,使開口的一端翻轉(zhuǎn),固定在外殼邊緣,有囊的一端露出內(nèi)胎的另一端約1厘米,注入50~60℃的溫水中,使海綿吸收,用溫度計(jì)蘸取生理鹽水或
液石蠟,插入假陰道內(nèi)4厘米處測溫。當(dāng)降至43℃左右時(shí)即可采精。測溫時(shí)要注意外界條件,如氣溫低、降溫快,內(nèi)胎溫度高些;反之可低些。對公兔采精每天僅采一次,如果兩次,第二次的精子則不成熟! 3、采精:采精的地點(diǎn)可在公兔籠內(nèi),左手拿一只母兔誘情,待公兔爬背時(shí),右手呈43度角持假陰道放在母兔后腿中間,待公兔射精后,立即將假陰道孔口朝上,以防精液流失。 4、假陰道溫度對采精效果有直接影響。公兔陰莖對溫度極為敏感,低于40℃不易引起射精;過高溫度采精會(huì)養(yǎng)成嗜高溫的壞習(xí)慣,對精液品質(zhì)也有影響。由于母兔的正常體溫在39~40.5℃之間,因此,假陰道溫度以40~42℃之間為宜。 二、精液的檢查與稀釋 1、精液的檢查 外觀檢查:正常公兔的精液呈淡乳白色,具有特殊的腥味,也有少數(shù)兔子的精液不正常,混入尿液的色黃有臭味;生殖器有炎癥出血的帶紅色;清水樣的為無精子。兔子的精量很少,一般在0.2~2毫升之間,平均為0.8毫升。在實(shí)際應(yīng)用中,一般以目測估計(jì)。 顯微鏡檢查:主要是精子密度的檢查和活力的評定。精子密度是指單位容積內(nèi)所含有的精子數(shù)目。精子數(shù)的計(jì)算,直接關(guān)系到授精劑量中含有活精子數(shù)。在實(shí)踐中常用目測法。目測法是根據(jù)精子在視野中分布的概況,即精子與精子之間的距離評定為密、中、稀三種等級。這種方法雖是主觀評定,但簡便易行,實(shí)際工作中多采用此法。家兔的精子密度隨季節(jié)變化也十分明顯! 【踊盍κ侵妇褐兄本前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子所占百分率。標(biāo)記0.90.80.7……,分別代表90%、80%、70%……的精子具有前進(jìn)運(yùn)動(dòng)力。這是一種主觀評定法,有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)員估計(jì)的結(jié)果往往很接近實(shí)際數(shù)。兔子的精子活力應(yīng)在0.5級以上方可用于授精。如在0.5級以下則受精率很低。不同季節(jié)的精子活力差異也十分明顯,9至10月平均活力僅0.15級;12月至次年2月平均活力0.51級;3至5月平均活力0.61級! 2、精液的稀釋 精液稀釋的目的首先是為了擴(kuò)大精液量,增加輸精母兔只數(shù),同時(shí)也是為了延長精子存活時(shí)間。在配制稀釋保存液時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮下列因素! I養(yǎng)成分:精子在代謝過程中主要是單方面的分解作用。成熟的精子不能通過同化作用將外界物質(zhì)變成本身的成分。因此為了補(bǔ)充精子的能量消耗,只有用最簡單的營養(yǎng)物質(zhì),目前常用的是:果糖、山梨醇、
甘油磷酸膽堿(GPC)和磷脂! ”Wo(hù)成分:緩沖物質(zhì)——為了保持精液適當(dāng)?shù)膒H值,常用
檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉等。防冷擊保護(hù)劑——常用的有
卵磷脂、卵黃、蛋白陳、乳類。制菌物質(zhì)——常用
青霉素(每l毫升稀釋液加入500~1000單位)、
鏈霉素(每l毫升稀釋液加人500~1000微克)! 〖彝镁拥睦硐胂♂屢簭V泛應(yīng)用的是0.9%的
氯化鈉或5%的
葡萄糖溶液,稀釋倍數(shù)一般為9倍。稀釋時(shí)稀釋液的溫度應(yīng)與精液等溫。稀釋液注大集精瓶(袋)的速度不能過快。注入后再用玻璃棒輕輕攪動(dòng),使其均勻混合。稀釋后的精液應(yīng)作一次顯微鏡檢查,發(fā)現(xiàn)活力不強(qiáng)或死亡過多的精子則不能用作輸精! ∪、輸精方法輸精就是將精液注入母兔的生殖道內(nèi),是人工授精的最后一環(huán)。 輸精器:可用玻璃輸精器,前端長l0厘米左右的空心小玻管與2毫升注射器相連,也可用實(shí)驗(yàn)用滴管代替,每輸精一次應(yīng)更換一支無菌輸精器! ≥斁竿玫倪x擇:應(yīng)選擇健康無病,處于發(fā)情期的母兔進(jìn)行授精,這對提高受胎率有很大益處! 〈碳つ竿门怕眩耗竿冒l(fā)情后,如無交配或其它蘊(yùn)含物刺激則不會(huì)排卵。人工授精缺乏交配的刺激性。然而對母兔注射促排卵素3號卻有較好的促排卵效果,每只兔注射0.5微克,母兔輸精前后注射都同樣有效! ≥斁河芍肿プ∧竿玫谋巢浚鼓竿猛尾柯猿,輸精員持輸精器(如一人操作可一手抓兔,一手持輸精器)。取經(jīng)過稀釋的精液0.5毫升(約含精子1000萬個(gè)以上)慢慢插入母兔陰道內(nèi)約6~7厘米處即可輸精。輸精器及精液必須加溫至與兔子體溫相接近,輸精前可放在35℃的溫水中保溫。插入時(shí)應(yīng)輕輕向前上方旋動(dòng),要邊旋邊進(jìn),切不可硬插,以免損傷生殖道。插入后可來回輕輕抽動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)幾次,有助于刺激子宮頸。抽出輸精器時(shí)也應(yīng)慢慢地邊轉(zhuǎn)動(dòng)邊抽出,以防精液隨輸精器溢出。抽出輸精器后,即由助手拍打一下兔子的臀部,使母兔受驚,以便精子吸入! ∶看屋斚♂屵^的精液需0.8毫升,一只種公兔的精子稀釋后可輸入10只母兔。整個(gè)人工授精過程要求動(dòng)作準(zhǔn)確,無菌操作。
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