| 公開(公告)號 | CN1428347A |
| 公開(公告)日 | 2003.07.09 |
| 申請(專利)號 | CN01136939.6 |
| 申請日期 | 2001.12.25 |
| 專利名稱 | 赤魟腫瘤抑制基因的克隆、表達(dá)及生物活性 |
| 主分類號 | C07H21/04 |
| 分類號 | C07H21/04;C07K14/435;C12P19/34;C12P21/02;C12N15/64;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京博奧環(huán)宇生物技術(shù)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 徐安龍;涂洪斌;熊茜 |
| 地址 | 100012北京市朝陽區(qū)亞運村惠忠北里312號天創(chuàng)世緣B2座1903室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 龍淳 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種如序列表中序列號碼1所示核苷酸序列的DNA。 |
| 摘要 | 本發(fā)明通過構(gòu)建赤魟(Dasytis akajei)尾刺cDNA文庫和DNA測序，并根據(jù)所獲得的IPL腫瘤抑制基因EST 3’端和載體核苷酸序列，設(shè)計引物，用PCR的方法，從赤魟尾刺cDNA文庫中篩選克隆到IPL全長基因。新基因長度為849bp，編碼136個氨基酸的成熟肽(序列號碼1)。所表達(dá)的蛋白質(zhì)等電點為9.68，分子量約為15,690道爾頓。將赤魟尾刺IPL基因克隆于硫氧還蛋白基因融合表達(dá)載體pTRX的trxA基因3’末端，構(gòu)建符合讀碼框的融合基因，該融合蛋白在大腸桿菌中以胞內(nèi)部分可溶的形式存在，表達(dá)量可達(dá)40～60mg/l。通過Ni-Chelating親和色譜層析，蛋白酶3C切割和凝膠過濾，得到純度在95％以上成熟的重組赤魟腫瘤抑制蛋白，得率為5～8mg/l。該蛋白具有抑制選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞生長的活性。 |
| 國際公布 |
