| 公開(公告)號 | CN1434057A |
| 公開(公告)日 | 2003.08.06 |
| 申請(專利)號 | CN03118695.5 |
| 申請日期 | 2003.02.26 |
| 專利名稱 | 可逆光致變色藻膽蛋白的制備方法 |
| 主分類號 | C07K14/405 |
| 分類號 | C07K14/405;C12N15/29;C12N15/70;C12P21/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 華中科技大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 趙開弘 |
| 地址 | 430074湖北省武漢市洪山區(qū)珞喻路1037號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 華中科技大學(xué)專利中心 |
| 代理人 | 曹葆青 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項 | 一種可逆光致變色藻膽蛋白的制備方法，其步驟為：(1)采用基因工程方法，分別將pecE和pecF克隆于表達(dá)載體中，將此重組表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌，從而得到相應(yīng)的大腸桿菌工程菌，應(yīng)用此工程菌生產(chǎn)PecE與PecF；(2)將PecE與PecF混合，得到藻紅藍(lán)蛋白裂合/異構(gòu)酶PecE/F；(3)采用基因工程方法，分別將pcE和pcF克隆于表達(dá)載體中，將此表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌，從而得到相應(yīng)的大腸桿菌工程菌，應(yīng)用此工程菌生產(chǎn)PcE與PcF；(4)將PcE與PcF混合，得到藻藍(lán)蛋白裂合酶PcE/F；(5)應(yīng)用基因工程方法表達(dá)PecA類脫輔基蛋白；(6)將步驟2得到的PecE/F、步驟4得到的PcE/F、步驟5得到的脫輔基蛋白與PC或α-PC混合，按如下反應(yīng)條件反應(yīng)：反應(yīng)溫度20～45℃，pH值7～8.5；反應(yīng)所需的輔助因子包括：①二價錳離子、鎂離子或鈣離子中的一種或幾種，其總濃度為1～5mmol/L，和②巰基乙醇、二硫蘇糖醇、還原型谷胱甘肽或其它巰基化合物中的一種或幾種，其總濃度為2～10mmol/L。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種可逆光致變色藻膽蛋白的制備方法，通過基因工程表達(dá)可逆光致變色藻膽蛋白的脫輔基蛋白、相應(yīng)的催化藻藍(lán)膽素從藻藍(lán)蛋白裂解的藻藍(lán)蛋白裂合酶、相應(yīng)的催化藻膽蛋白脫輔基蛋白與藻膽色素共價偶聯(lián)的藻紅藍(lán)蛋白裂合/異構(gòu)酶，然后應(yīng)用此裂合酶、此裂合/異構(gòu)酶催化藻藍(lán)膽素從藻藍(lán)蛋白及其α亞基轉(zhuǎn)移，并同時與藻膽蛋白脫輔基蛋白體外重組，從而制備可逆光致變色的藻膽蛋白。本發(fā)明方法中，整個反應(yīng)過程不涉及使用有機(jī)溶劑和去污劑，只使用蛋白質(zhì)與水溶液，是一種環(huán)境友好的綠色生產(chǎn)工藝。因此，此可逆光致變色藻膽蛋白制備方法更適合應(yīng)用于食品、保健與醫(yī)藥功能領(lǐng)域中。 |
| 國際公布 |
