公開(公告)號 | CN1118578C |
公開(公告)日 | 2003.08.20 |
申請(專利)號 | CN00125305.0 |
申請日期 | 2000.09.21 |
專利名稱 | 一種利用中國紅豆杉細胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法 |
主分類號 | C12P17/02 |
分類號 | C12P17/02;C12P7/62 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 華東理工大學 |
發(fā)明(設計)人 | 鐘建江;董浩迪 |
地址 | 200237上海市梅隴路130號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 上海順華專利代理有限責任公司 |
代理人 | 李鴻儒 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權(quán)項 | 一種利用中國紅豆杉細胞生產(chǎn)云南紫杉烷的方法,包括從植株幼莖外植體誘導的愈傷組織中分離獲得中國紅豆杉細胞,其特征在于還包括如下步驟:(1)將中國紅豆杉細胞移入液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基采用Murashige-Skoog培養(yǎng)基,另添加0.1-1.0mg/L6-芐基腺嘌呤,0.05-0.5mg/L2,4-二氯苯氧乙酸,0.05-0.5mg/L萘乙酸,20-500mg/L抗壞血酸及10-50mg/L蔗糖,每隔14天傳代一次,培養(yǎng)使用旋轉(zhuǎn)式搖床,轉(zhuǎn)速為60-200rpm,培養(yǎng)溫度20-30℃,暗培養(yǎng),接種量為20-200g/L濕重;(2)然后將所獲得的中國紅豆杉濕細胞置于含培養(yǎng)基的搖瓶中暗培養(yǎng),培養(yǎng)周期為12-25天,從所獲得的培養(yǎng)物中采用常規(guī)的方法收集云南紫杉烷;在搖瓶培養(yǎng)前期細胞快速生長階段,添加誘導劑二氫甲基茉莉酮酸酯或甲基茉莉酮酸酯至培養(yǎng)基中誘導劑的最終濃度為1-1000μM。 |
摘要 | 本發(fā)明提供了一種利用中國紅豆杉細胞生產(chǎn)紫杉烷類的方法。本發(fā)明利用中國紅豆杉細胞(Taxus chinensis)的懸浮培養(yǎng),通過誘導劑的誘導與補糖添加的組合,十分顯著地提高了云南紫杉烷(Tc)的生產(chǎn)效率,獲得的Tc產(chǎn)量大大超過目前文獻報道的最高值,Tc生產(chǎn)率最高可達30.2mg/(L.d),最高產(chǎn)量可達538.9mg/L,是一種很有工業(yè)應用前景的Tc的生產(chǎn)方法。 |
國際公布 |