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動物乳腺內(nèi)表達(dá)成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)的重組DNA的構(gòu)建方法

公開(公告)號 CN1440982A  
公開(公告)日 2003.09.10  
申請(專利)號 CN02114900.3  
申請日期 2002.02.27  
專利名稱 動物乳腺內(nèi)表達(dá)成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)的重組DNA的構(gòu)建方法  
主分類號 C07K14/50  
分類號 C07K14/50;C12N15/09  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 黃偉民  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃偉民;溫漢平  
地址 510075廣東省廣州市廣州大道北542號白云區(qū)軍休所11棟602號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建重組DNA以在動物乳汁中獲得成纖維細(xì)胞生長因子的方法,其特征是將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強(qiáng)子的DNA片段與成纖維細(xì)胞生長因子DNA的完整或不完整片段直接或間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當(dāng)?shù)腄NA載體,構(gòu)成重組DNA,以此重組DNA配合乳腺導(dǎo)管內(nèi)注射或其它建立生物反應(yīng)器的方法,在乳汁中獲得活性成纖維細(xì)胞生長因子。  
摘要 本發(fā)明涉及一種用分子生物學(xué)技術(shù)在乳汁中獲得成纖維細(xì)胞生長因子的方法,克服了用現(xiàn)有技術(shù)提取或人工生產(chǎn)成纖維細(xì)胞生長因子之技術(shù)難度大、成本高、產(chǎn)量低等不足,將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強(qiáng)子的DNA片段與成纖維細(xì)胞生長因子DNA的完整或不完整片段直接或通過T7RNA聚合酶與T7啟動子偶連系統(tǒng)等方法間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當(dāng)?shù)腄NA載體,構(gòu)成重組DNA,經(jīng)過克隆篩選、擴(kuò)增、純化之后,與脂質(zhì)體等物質(zhì)混合,然后直接注入動物的乳腺導(dǎo)管內(nèi),讓重組DNA進(jìn)入乳腺分泌細(xì)胞,或用常規(guī)的建立生物反應(yīng)器的方法建立乳腺定位表達(dá)生物反應(yīng)器,在分泌細(xì)胞分泌乳汁時,重組DNA得以表達(dá),用常規(guī)的方法擠得乳汁,可從乳汁中獲重組DNA的表達(dá)產(chǎn)物——成纖維細(xì)胞生長因子,本方法具有方法簡單、成本低、成纖維細(xì)胞生長因子活性高、產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)。  
國際公布  
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