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一種快速檢測(cè)CpG胞嘧啶甲基化的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1125185C  
公開(kāi)(公告)日 2003.10.22  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN00129641.8  
申請(qǐng)日期 2000.09.29  
專利名稱 一種快速檢測(cè)CpG胞嘧啶甲基化的方法  
主分類號(hào) C12Q1/68  
分類號(hào) C12Q1/68;G01N30/02  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 北京市腫瘤防治研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 鄧大君;周靜  
地址 100034北京市西城區(qū)大紅羅廠街1號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司  
代理人 萬(wàn)學(xué)堂  
國(guó)省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種檢測(cè)CpG胞嘧啶甲基化的方法,包括下列步驟:1〕用亞硫酸氫鈉處理部分待測(cè)樣品DNA;  
摘要 本發(fā)明涉及檢測(cè)DNA胞嘧啶甲基化的方法,包括:1〕用亞硫酸氫鈉處理部分待測(cè)樣品DNA;2〕根據(jù)目標(biāo)片段處理前兩端不含CpG的部位,設(shè)計(jì)2對(duì)引物,對(duì)處理前、后DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增;3〕在未甲基化目標(biāo)片段的tPCR產(chǎn)物的變性(解鏈)溫度下測(cè)定樣品tPCR產(chǎn)物的色譜保留時(shí)間;4〕將tPCR產(chǎn)物保留時(shí)間明顯延長(zhǎng)樣品目標(biāo)片段的wPCR產(chǎn)物與野生型對(duì)照樣品等量混合,進(jìn)行變性和復(fù)性雜交處理,測(cè)定樣品目標(biāo)片段是否存在點(diǎn)突變。該方法能反映整個(gè)目標(biāo)片段中CpG的胞嘧啶甲基化狀態(tài),簡(jiǎn)易、快速、成本低廉、準(zhǔn)確。  
國(guó)際公布  
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