公開(公告)號
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CN1470637A
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公開(公告)日
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2004.01.28
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申請(專利)號
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CN02136176.2
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申請日期
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2002.07.24
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專利名稱
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一種乙型肝炎病毒核心蛋白突變體及其用途
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主分類號
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C12N15/63
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分類號
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C12N15/63;C12N15/11;C12N15/31;A61K31/7088;A61K39/29;A61P1/16;A61P31/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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戚中田;武文斌;潘衛(wèi);曹廣文
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地址
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200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中原信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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羅大忱
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種將野生型蛋白進(jìn)行突變的方法,其特征是構(gòu)建顯性負(fù)調(diào)節(jié)或性狀缺失突變體,該方法包括下列步驟:a構(gòu)建含有特定基因突變的表達(dá)載體,b利用構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化特定靶細(xì)胞。
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摘要
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本發(fā)明采用PCR技術(shù)從含有HBV全基因序列的質(zhì)粒pHBV-A1中擴(kuò)增出全長HBV C基因與S基因,經(jīng)酶切連接后實(shí)現(xiàn)了兩基因的融合,并進(jìn)一步構(gòu)建成含有核心蛋白與表面蛋白融合基因(核心蛋白突變體)的真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA 3.1+-CS。該質(zhì)粒能在HepG2215及HepG2細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出核心蛋白突變體,并能抑制HBV顆粒包裝,使成熟病毒數(shù)量降低,表明表達(dá)HBV核心蛋白突變體的HepG2215及HepG2細(xì)胞獲得了抗HBV感染的胞內(nèi)免疫力。這一核心蛋白突變體基因具有臨床使用價(jià)值。
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國際公布
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