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通過(guò)檢測(cè)人類(lèi)T細(xì)胞受體TCR基因在治療前后的變化來(lái)評(píng)價(jià)治療HIV藥物療效的方法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 北京佰仁思生物工程有限責(zé)任公司/寇忠琛
公開(kāi)(公告)號(hào) CN1480537A  
公開(kāi)(公告)日 2004.03.10  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN02131070.X  
申請(qǐng)日期 2002.09.28  
專(zhuān)利名稱(chēng) 通過(guò)檢測(cè)人類(lèi)T細(xì)胞受體TCR基因在治療前后的變化來(lái)評(píng)價(jià)治療HIV藥物療效的方法  
主分類(lèi)號(hào) C12Q1/68  
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 北京佰仁思生物工程有限責(zé)任公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 寇忠琛  
地址 102200北京市海淀區(qū)中關(guān)村科技園區(qū)昌平園星火街6號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 北京匯澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 張若華  
國(guó)省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 通過(guò)檢測(cè)人類(lèi)T細(xì)胞受體TCR基因在治療前后的變化來(lái)評(píng)價(jià)治療HIV藥物療效的方法,其步驟為:a.血樣經(jīng)采集分離后,得到外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),再進(jìn)一步分離出CD4或CD8T細(xì)胞;b.分離和提純出T細(xì)胞的mRNA后,通過(guò)mRNA合成得到cDNA;c.在極其靠近CDR3區(qū)段V基因區(qū)設(shè)計(jì)24個(gè)內(nèi)側(cè)Vβ基因引物和一個(gè)側(cè)Cβ基因引物,C區(qū)基因引物的5′端插入七個(gè)非模板堿基(GTTTCTT),Cβ基因引物采用高靈敏度的熒光(6-FAM)標(biāo)記;d.將設(shè)計(jì)的引物和由mRNA合成的cDNA通過(guò)兩次PCR反應(yīng)來(lái)擴(kuò)增cDNA;e.將經(jīng)過(guò)兩次PCR反應(yīng)擴(kuò)增并被熒光標(biāo)記的T細(xì)胞受體基因,與甲酰胺混合后94℃變性,將樣本置于含6%丙烯酰胺的測(cè)序凝膠中,在DNA測(cè)序機(jī)上運(yùn)行,得到的數(shù)據(jù)用ABIPRISMGeneScan分析軟件進(jìn)行分析和量化,得出藥物療效的評(píng)價(jià)結(jié)果。  
摘要 發(fā)明提供一種通過(guò)設(shè)計(jì)的特定引物來(lái)完成PCR反應(yīng),放大感染HIV病毒的患者的T細(xì)胞受體TCR基因在接受藥物治療前后的變化,進(jìn)而評(píng)價(jià)藥物的療效的方法,本發(fā)明提供的技術(shù)不但填補(bǔ)了技術(shù)上的空白而且具有靈敏度高,準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn)。  
國(guó)際公布  
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