公開(公告)號(hào) | CN1151174C |
公開(公告)日 | 2004.05.26 |
申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN98125622.8 |
申請(qǐng)日期 | 1998.12.21 |
專利名稱 | 抗人淋巴細(xì)胞球蛋白制備方法 |
主分類號(hào) | C07K16/24 |
分類號(hào) | C07K16/24 |
分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 蔣盤宏 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 蔣盤宏;尹翼鳴 |
地址 | 100021 北京市朝陽區(qū)勁松南路13號(hào) |
頒證日 | 2004.05.26 |
國(guó)際申請(qǐng) | |
進(jìn)入國(guó)家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | |
代理人 | |
國(guó)省代碼 | 北京;11 |
主權(quán)項(xiàng) | 抗人淋巴細(xì)胞球蛋白制備方法,其特征在于它按下述步驟進(jìn)行:a)采用人胸腺或胸導(dǎo)管引流液或人血中的T淋巴細(xì)胞液為抗原與福氐完全佐劑充分混合進(jìn)行一次基礎(chǔ)免疫家兔或馬,再與不完全佐劑充分混合加強(qiáng)免疫家兔或馬2-4次,采集血液測(cè)定血清的免疫效價(jià)達(dá)到1∶400時(shí),停止免疫,并分離合格免疫血清。b)在(a)項(xiàng)的合格免疫血清中用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水釋1-3倍后,加入醛化的其終濃度分別為105-108細(xì)胞/ml的人血小板和紅細(xì)胞與胎盤組織混合3-4小時(shí),離心除去血漿中的抗血小板、抗紅細(xì)胞抗體及其它抗體,收集上清液,即得到初級(jí)抗人淋巴細(xì)胞球蛋白血清。c)然后在(b)項(xiàng)的初級(jí)抗人淋巴細(xì)胞球蛋白血清中加入-5℃乙醇進(jìn)行沉淀,使其最終濃度為19%,攪拌后靜置1-2小時(shí),離心分離,收集沉淀,尾棄上清液,再將沉淀用EDAE平衡緩沖液溶解制成懸液,然后把懸液加入到EDAE離子換柱進(jìn)行層析,再用緩沖液洗滌,直至無球蛋白為止后用0.1-1.0M的氯化鈉溶液梯度洗脫,收集球蛋白峰。經(jīng)超濾脫鹽濃縮,即得到提純的抗人淋巴細(xì)胞球蛋白液體,再加入賦型劑后除菌過濾,收集濾液。d)最后將濾液分裝或凍干即為產(chǎn)品。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及抗人淋巴細(xì)胞球蛋白制備方法,其特征在于它采用人胸腺或胸導(dǎo)管引流液或人血中的T淋巴細(xì)胞為抗原,免疫家兔或馬,分離免疫血清,用緩沖劑或生理鹽水稀釋加入醛化人血小板、紅細(xì)胞和胎盤組織,除雜抗體,再用乙醇沉淀和離子交換或用正辛酸和硫酸銨提純,得到95%以上純度的抗人淋巴細(xì)胞球蛋白的產(chǎn)品,該方法有效的除去雜抗,降低毒副作用,純度高,治療效果好。 |
國(guó)際公布 |