公開(公告)號(hào)
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CN1510129A
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公開(公告)日
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2004.07.07
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02158022.7
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申請(qǐng)日期
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2002.12.24
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專利名稱
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雙殺傷功能的重組腺病毒的構(gòu)建及其在腫瘤治療中的應(yīng)用
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主分類號(hào)
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C12N7/01
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分類號(hào)
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C12N7/01;C12N15/33;A61K39/235;A61P35/00
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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李冬田
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李冬田;李秋香;佟惠春;李菲;;尹冰楠;李光明
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地址
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300060天津市河西區(qū)體院北育賢里18門301
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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天津三元專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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周永銓
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國(guó)省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種雙殺傷功能的重組腺病毒的構(gòu)建,其特征在于:該重組腺病毒是含CDglyES融合基因或TKglyES融合基因的重組腺病毒,它是以缺失E1區(qū)的rAdCD和rAdTK為材料,行PCR擴(kuò)增CD和TK基因片段;以肝癌旁正常肝組織為材料,行RT-PCR擴(kuò)增出ES基因片段,然后順序?qū)D、ES或TK、ES插入pAdTrack-CMV穿棱質(zhì)粒構(gòu)建成目的穿梭質(zhì)粒,將二種目的穿梭質(zhì)粒分別與腺病毒pAdEasy-1骨架質(zhì)粒在細(xì)菌中同源性重組,獲得二種重組腺病毒質(zhì)粒,分別轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,即可獲得雙殺傷功能的的二種重組腺病毒。
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摘要
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雙殺傷功能的重組腺病毒的構(gòu)建及其在腫瘤治療中的應(yīng)用。它是以缺失E1的已構(gòu)建的rAdCD、rAdTK及新鮮人肝癌旁正常組織為材料,分別行PCR擴(kuò)增出CD、TK和ES基因片段,將CD-ES或TK-ES以融合基因的形式插入穿梭質(zhì)粒(pAdTrack-CMV),構(gòu)成目的穿梭質(zhì)粒(pAdTrack-CMVCDglyES或pAdTrack-CMVTKglyES),再與腺病毒5型骨架質(zhì)粒pAdEasy-1在細(xì)菌內(nèi)同源性重組,獲得重組腺病毒質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,獲得二種雙殺傷功能的重組腺病毒。所構(gòu)建的重組腺病毒安全、穩(wěn)定,能夠從直接殺傷瘤細(xì)胞和抑制腫瘤新生血管形成,阻止瘤細(xì)胞遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移間接殺傷瘤細(xì)胞兩個(gè)途徑殺傷腫瘤,是一種嶄新的腫瘤基因治療方法。
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國(guó)際公布
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