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動物狂犬病病毒糖/核蛋白“二價”DNA疫苗

公開(公告)號 CN1513554A  
公開(公告)日 2004.07.21  
申請(專利)號 CN03111295.1  
申請日期 2003.03.28  
專利名稱 動物狂犬病病毒糖/核蛋白“二價”DNA疫苗  
主分類號 A61K39/205  
分類號 A61K39/205;A61K39/00;A61P31/12;C12N15/47  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍軍需大學(xué)軍事獸醫(yī)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 扈榮良;張守峰;袁慧君  
地址 130062吉林省長春市西安大路175號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 吉林長春新紀元專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 王薇  
國省代碼 吉林;22  
主權(quán)項 一種動物狂犬病病毒糖/核蛋白“二價”DNA疫苗,是以狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白和核蛋白cDNA經(jīng)以下步驟分別構(gòu)建出以pVAX1和pIRES為載體的基因疫苗;(1)、從克隆載體pTG中通過Pst I和Xba I酶切將糖蛋白cDNA克隆入經(jīng)相同酶切的pVAXl中,構(gòu)建重組疫苗pVG;(2)、從克隆載體pTN2中用HindIII和Sma I酶切將核蛋白cDNA克隆入經(jīng)HindIII和EcoRV酶切的pVAXl中,構(gòu)建重組疫苗pVN;(3)、從克隆載體pVG用EcoR I和Xba I酶切將糖蛋白cDNA克隆入經(jīng)EcoRV酶切的pIRES中構(gòu)建重組表達載體pIG;(4)、從克隆載體pTN2中用Hinc II和Xba I酶切將核蛋白cDNA克隆入經(jīng)Sma I和Xba I酶切的pIG中構(gòu)建重組疫苗pIGN;(5)、將上述DNA疫苗經(jīng)堿裂解法制備后,800~4000μg/ml溶于生理鹽水中,按糖蛋白:核蛋白按25-100μg:25-100μg/100μl比例混合。  
摘要 本發(fā)明涉及一種動物狂犬病病毒糖/核蛋白“二價”DNA疫苗,是通過RT-PCR和克隆技術(shù)獲得了狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白cDNA和核蛋白cDNA,以上述糖蛋白和核蛋白cDNA為目的基因,分別制備了以pVAX1和pIRES為載體的基因疫苗。將兩種基因疫苗聯(lián)合(“二價”),以裸質(zhì)粒形式或以司苯-甘油為佐劑形式免疫小和犬3-4次后,免疫動物可產(chǎn)生良好的體液免疫和細胞免疫。該“二價”DNA疫苗無感染性,使用安全,免疫效果明確。是預(yù)防狂犬病的一種新型疫苗。  
國際公布  
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