| 公開(公告)號 | CN1519321A |
| 公開(公告)日 | 2004.08.11 |
| 申請(專利)號 | CN03150703.4 |
| 申請日期 | 2003.09.01 |
| 專利名稱 | 一種構建人載脂蛋白AIm表達基因的制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/12 |
| 分類號 | C12N15/12;C12N15/63;C12P21/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海凱曼生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 龔邦強;丁滿生;張梅芳 |
| 地址 | 200233上海市漕河涇高科技開發(fā)區(qū)田林路219號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海開祺專利代理有限公司 |
| 代理人 | 費開逵 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種獲得高活性的人載脂蛋白pro-ApoAIm的制備方法由下列步驟組成：a、設計pApoAIm PCR引物核苷酸序列制成pro-ApoAIm基因；b、構建表達基因PET12a/PApOAIm重組質粒；c、工程菌構建；d、構建的工程發(fā)酵；e、pro-ApoAIm蛋白的純化；f、pro-ApoAIm蛋白二聚體的制備。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種構建人載脂蛋白AImilano表達基因的制備方法。該方法采用PCR引物制成pro-ApoAIm的基因，構建表達基因PET12a/PAPOAIm重組質粒再進行工程菌的構建，然后構建的工程菌在一定的發(fā)酵條件下發(fā)酵，進行pApoAIm的蛋白純化，純化的蛋白再制成pro-ApoAIm蛋白二聚體形式。本方法具有pro-ApoAIm比ApoAIm性質更穩(wěn)定，在大腸桿菌表達體系中采用T7啟動子表達載體pET12a，用IPTG誘導目的蛋白的生產，產生蛋白是包涵體，它能有效防止蛋白水解酶對異源蛋白的水解等特點。 |
| 國際公布 |
