| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1539979A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.10.27 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200310108141.7 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.10.24 |
| 專利名稱 | 具有綠色熒光蛋白示蹤和抗性篩選標(biāo)記的RNAi載體pGO |
| 主分類號(hào) | C12N15/63 |
| 分類號(hào) | C12N15/63;C12N15/79;A61K48/00;A61P35/00 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王紅陽(yáng);鄢和新;張瑞;陳磊;吳孟超 |
| 地址 | 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海新天專利代理有限公司 |
| 代理人 | 丁振英 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種RNAi載體pGO，包括pUC復(fù)制起點(diǎn)pUCori、fl復(fù)制起點(diǎn)flori、細(xì)菌啟動(dòng)子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6啟動(dòng)子U6promoter和多克隆位點(diǎn)MCS，其特征在于還含有用于表達(dá)綠色熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)錄元件，包括CMV啟動(dòng)子CMVpromoter、增強(qiáng)綠色熒光蛋白基因EGFP和SV40PolyA，以及用于表達(dá)真核細(xì)胞抗性篩選標(biāo)志的新霉素基因轉(zhuǎn)錄元件，包括SV40早期啟動(dòng)子SV40epromoter和新霉素抗性基因Neo。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及醫(yī)藥分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，是一種可用于特異性抑制靶基因表達(dá)的具有綠色熒光蛋白示蹤和真核細(xì)胞抗性篩選標(biāo)記的RNA干擾(RNAi)載體pGO。本發(fā)明RNAi載體pGO是對(duì)pEGFP-C2載體的改造，去除了其原有的多克隆位點(diǎn)，在SV40 polyA和fl原核復(fù)制起點(diǎn)之間插入帶有相應(yīng)多克隆位點(diǎn)的U6啟動(dòng)子構(gòu)成。只要在U6啟動(dòng)子下游的多克隆位點(diǎn)中的適當(dāng)位點(diǎn)插入針對(duì)靶基因的siRNA模板，轉(zhuǎn)染細(xì)胞后就可特異并有效地抑制該基因的表達(dá)。因而本發(fā)明的RNAi載體pGO可用于制備研究基因功能的試劑或用于抗腫瘤藥物的研究和開(kāi)發(fā)。 |
| 國(guó)際公布 |
