| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1557964A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.12.29 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410016012.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.01.19 |
| 專利名稱 | 一種芯片原位聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)目標(biāo)基因的方法 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院上海微系統(tǒng)與信息技術(shù)研究 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 趙建龍;高秀麗;楊劍波;景奉香 |
| 地址 | 200050上海市長(zhǎng)寧區(qū)長(zhǎng)寧路865號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 潘振甦 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種芯片原位PCR檢測(cè)目標(biāo)基因的方法，其特征在于根據(jù)目標(biāo)基因設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物，上游引物的5’端連接有15-20個(gè)堿基長(zhǎng)的多聚胸腺嘧啶結(jié)構(gòu)，這種上游引物的5’端再經(jīng)氨基修飾后點(diǎn)于醛基修飾的玻片上，然后以待測(cè)樣品的基因組脫氧核糖核酸為模板，在芯片上進(jìn)行原位PCR反應(yīng)，利用DNA聚合酶的特異性來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)特定目的片段的擴(kuò)增，在引物延伸過(guò)程中加入地高辛標(biāo)記的dUTP，隨后采用傳統(tǒng)酶標(biāo)技術(shù)對(duì)延伸產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，使檢測(cè)結(jié)果通過(guò)底物顏色呈現(xiàn)于尼龍膜或硝酸纖維膜表面，檢測(cè)結(jié)果可直接目測(cè)或用廉價(jià)的光學(xué)掃描儀讀取數(shù)據(jù)，從而實(shí)現(xiàn)樣品的處理、標(biāo)記同步化和原位檢測(cè)。 |
| 摘要 | 一種利用基因芯片的檢測(cè)方法，是在芯片表面進(jìn)行原位PCR反應(yīng)對(duì)待測(cè)基因進(jìn)行檢測(cè)的方法。將普通PCR反應(yīng)中的上游引物連接poly(T)的臂結(jié)構(gòu)后，5’端氨基修飾后連接于醛基修飾的玻片等載體上，在芯片表面上進(jìn)行的一種芯片原位PCR反應(yīng)。利用本發(fā)明能有效解決目前基因芯片雜交中小片斷探針和待測(cè)大片段不能有效雜交的問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了樣品處理和標(biāo)記同步化和原位檢測(cè)。本發(fā)明可用于SNP檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因植物檢測(cè)、疾病檢測(cè)等方面。 |
| 國(guó)際公布 |
