公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1181887C
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公開(kāi)(公告)日
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2004.12.29
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02138397.9
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申請(qǐng)日期
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2002.10.08
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專利名稱
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重組γ-干擾素預(yù)防和治療奶牛隱性乳房炎
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主分類號(hào)
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A61K38/21
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分類號(hào)
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A61K38/21;C12N15/81;C07K14/555;A61P15/14
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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揚(yáng)州大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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秦愛(ài)建;許金俊;金文杰;劉岳龍
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地址
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225009 江蘇省揚(yáng)州市文匯東路12號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識(shí)律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國(guó)省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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權(quán)利要求書1一種重組γ-干擾素的應(yīng)用,其特征在于以原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)BovIFN-γ基因,將BovIFN-γ基因與PGEX-6P-1連接,以其表達(dá)融合蛋白作為制備奶牛隱性乳房炎預(yù)防和治療的藥物。
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摘要
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)制藥工業(yè)中的基因工程生產(chǎn)多肽藥物的技術(shù)領(lǐng)域。應(yīng)用一步法逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù)對(duì)奶牛γ-干擾素(BovIFN-γ)基因的cDNA序列進(jìn)行擴(kuò)增,從奶牛脾淋巴細(xì)胞的總RNA中擴(kuò)增出特異性片段。將BovIFN-γ基因克隆到大腸桿菌表達(dá)載體PGEX-6P-1谷光甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的下游,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,表達(dá)融合蛋白;或?qū)ovIFN-γ基因克隆到酵母高效表達(dá)載體,通過(guò)轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞,獲得陽(yáng)性克隆,并大量表達(dá)基因產(chǎn)物;通過(guò)親和層析純化,大量制備表達(dá)產(chǎn)物,通過(guò)細(xì)胞病變抑制試驗(yàn)證實(shí),表達(dá)產(chǎn)物有極好的抑制VSV病毒的活性;?qū)ovIFN-γ基因插入到pcDNA3,通過(guò)大量制備質(zhì)粒DNA,以質(zhì)粒DNA直接注射奶牛乳腔,使其BovIFN-γ基因在乳腺中大量表達(dá),從而達(dá)到預(yù)防或治療奶牛隱性乳房炎的目的。
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國(guó)際公布
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