| 公開(公告)號 | CN1570089A |
| 公開(公告)日 | 2005.01.26 |
| 申請(專利)號 | CN200410018070.6 |
| 申請日期 | 2004.04.29 |
| 專利名稱 | 一種誘導骨髓基質(zhì)細胞定向分化的方法 |
| 主分類號 | C12N5/08 |
| 分類號 | C12N5/08 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 復旦大學附屬中山醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設計)人 | 鐘春玖;劉康達;王志軍 |
| 地址 | 200032上海市醫(yī)學院路136號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 包兆宜 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種誘導骨髓基質(zhì)細胞定向分化的方法，其特征是，在無血清條件下，采用神經(jīng)節(jié)苷脂誘導骨髓基質(zhì)細胞定向分化成神經(jīng)前體(干)細胞和神經(jīng)細胞，包括下述步驟，1)骨髓基質(zhì)細胞分離、純化和培養(yǎng)無菌條件取實驗動物股骨，用d-Hank’s液沖洗骨髓，收集沖洗液并制成單細胞懸液、離心。用含20％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液懸浮沉淀的細胞、接種于培養(yǎng)瓶，37℃、5％CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。當骨髓基質(zhì)細胞達80％融合時，用0.25％的胰酶消化傳代。以第四~六代骨髓基質(zhì)細胞進行定向誘導、分化；2)、MSCs定向誘導更換培養(yǎng)液2天后換液并添加0.01~100mMol/L的神經(jīng)節(jié)苷脂，分別誘導；3)、MSCs和誘導細胞形態(tài)學觀察；4)免疫細胞化學染色誘導細胞分別用巢蛋白、NSE、GFAP抗體進行細胞免疫熒光染色。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于生物技術領域，具體涉及一種誘導骨髓基質(zhì)干細胞定向分化為神經(jīng)干細胞、神經(jīng)前體細胞或神經(jīng)細胞的方法。本發(fā)明方法通過骨髓基質(zhì)細胞分離、純化和培養(yǎng)，及誘導、分化，經(jīng)形態(tài)學和免疫細胞化學染色證明，采用腦源性膜信號相關物質(zhì)一神經(jīng)節(jié)苷脂能高比例地誘導骨髓基質(zhì)細胞定向分化為神經(jīng)干細胞、神經(jīng)前體細胞或神經(jīng)細胞誘導骨髓基質(zhì)干細胞。經(jīng)誘導后的神經(jīng)前體(干)細胞、神經(jīng)細胞經(jīng)靜脈輸注移植或腦內(nèi)移植具有治療帕金森病或綜合征、中風及其后遺癥、脊髓損傷及其后遺癥、阿爾茨海默病(老年性癡呆)等作用。具有廣泛臨床應用前景。 |
| 國際公布 |
