公開(公告)號
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CN1620465A
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公開(公告)日
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2005.05.25
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申請(專利)號
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CN02828331.7
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申請日期
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2002.02.05
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專利名稱
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重組胎盤生長因子的制備方法
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主分類號
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C07K14/475
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分類號
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C07K14/475;C12N15/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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蓋莫納股份公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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D·瑪格里尼;M·巴緹斯特;E·康緹;G·薩爾維亞;M·圖斯
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地址
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意大利阿納尼
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頒證日
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國際申請
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PCT/IT2002/000065 2002.2.5
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進(jìn)入國家日期
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2004.08.26
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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程泳
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國省代碼
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意大利;IT
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主權(quán)項(xiàng)
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一種提取和純化在修飾的原核細(xì)胞中的誘導(dǎo)型表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的重組胎盤生長因子(PLGF)的方法,包括下列步驟:I)該原核細(xì)胞的發(fā)酵,II)內(nèi)含體的提取和純化,III)所表達(dá)蛋白的復(fù)性,IV)離子交換層析,V)反相層析,其特征在于實(shí)施步驟(I)直到培養(yǎng)基在600nm的光密度達(dá)到1至50(OD6001-50),隨后誘導(dǎo);步驟(II)包括裂解培養(yǎng)細(xì)胞,使DNA斷裂和分離內(nèi)含體;在步驟(III)中,內(nèi)含體溶于變性緩沖液中并使表達(dá)蛋白至少部分恢復(fù)為二聚體形式;在步驟(IV)和(V)中,二聚體和多聚體形式的表達(dá)蛋白與單體形式分開并分離。
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摘要
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提取和純化在誘導(dǎo)型原核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的重組胎盤生長因子(PLGF)的方法包括下列步驟:I)細(xì)菌細(xì)胞的發(fā)酵,II)內(nèi)含體的提取和純化,III)表達(dá)蛋白的復(fù)性,IV)離子交換層析,V)反相層析。
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國際公布
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WO2003/066676 英 2003.8.14
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