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多脫氧核苷酸的合成方法

公開(公告)號(hào) CN1209464C  
公開(公告)日 2005.07.06  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN97110914.1  
申請(qǐng)日期 1997.04.18  
專利名稱 多脫核苷酸的合成方法  
主分類號(hào) C12P19/34  
分類號(hào) C12P19/34;C12N9/00;C12N15/52;C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.4.19 JP 122673/1996;1996.6.18 JP 156647/1996  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 大幸藥品株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 三浦孝典;緒方規(guī)男  
地址 日本大阪  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 段承恩  
國(guó)省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 一種多脫氧核苷酸的合成方法,其特征在于,在沒有模板以及引物兩者的存在下,將含有脫氧核苷酸和蛋白質(zhì)的反應(yīng)液加熱到20~90℃,使其反應(yīng)0.5~24小時(shí),使脫氧核苷酸聚合,其中所述脫氧核苷酸至少都含有脫氧腺苷5′-三磷酸(dATP)和脫氧胸腺嘧啶核苷5′-三磷酸(dTTP),上述蛋白質(zhì)是屬于Thermococcus屬的細(xì)菌的脫氧核苷酸聚合酶和/或?qū)儆赥hermus屬的細(xì)菌的脫氧核苷酸聚合酶。  
摘要 本發(fā)明提供在沒有模板和引物存在的條件下使耐熱性的脫氧核苷酸聚合酶作用于脫氧核苷酸合成多脫氧核苷酸的合成方法;以這樣得到的多脫氧核苷酸作探針篩選cDNA文庫(kù)的篩選方法;以及將上述合成的DNA結(jié)合到含有生物細(xì)胞的基因的雙鏈DNA的3′-OH末端,然后用它轉(zhuǎn)化細(xì)胞,通過培養(yǎng)該細(xì)胞使DNA插入染色體DNA,使來自該基因的蛋白質(zhì)表達(dá)的方法;染色體DNA的合成方法以及染色體的合成方法。還可提供創(chuàng)造天然不存在的DNA,再通過該基因創(chuàng)造新的蛋白質(zhì),提供新的生理的、藥理的活性物質(zhì)的手段。  
國(guó)際公布  
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