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白細胞介素-15基因修飾的自然殺傷細胞株及其制備方法

公開(公告)號 CN1233822C  
公開(公告)日 2005.12.28  
申請(專利)號 CN03152968.2  
申請日期 2003.09.05  
專利名稱 白細胞介素-15基因修飾的自然殺傷細胞株及其制備方法  
主分類號 C12N5/08  
分類號 C12N5/08;C12N15/79;C12N15/24;A61K38/20;A61P35/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學技術大學;山東省醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所  
發(fā)明(設計)人 田志剛;張 建;魏海明;張建華;孫 汭  
地址 230026安徽省合肥市金寨路96號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 合肥華信專利商標事務所  
代理人 余成俊  
國省代碼 安徽;34  
主權(quán)項 白細胞介素-15基因修飾的自然殺傷細胞株,其特征在于保藏號為CGMCCNo.0996的NK-92/IL-15細胞株。  
摘要 本發(fā)明公開了一種白細胞介素-15基因修飾的自然殺傷細胞株及其制備方法,該細胞株表型為CD56強陽性,CD16和CD3均為陰性,其形態(tài)為分散的、半貼壁生長狀態(tài)。其制備方法,是將IL-15的cDNA編碼區(qū)插入pcDNA3真核表達載體,構(gòu)建分泌型重組真核表達載體pcDNA3/IL-15;利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染NK-92細胞;在篩選培養(yǎng)基中加入Geneticin(G418)進行篩選;有限稀釋克隆化細胞,以IL-15的依賴細胞株測定克隆細胞培養(yǎng)上清中IL-15的活性,從中挑選出表達IL-15的陽性細胞克。粚⒃摽寺≡20~100 活性單位的IL-15的完全α-MEM 培養(yǎng)基中進行擴增,得到具有臨床應用價值的工程細胞株。適于臨床用于過繼免疫治療腫瘤。  
國際公布  
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