| 公開(公告)號(hào) | CN1300321C |
| 公開(公告)日 | 2007.02.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410041045.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.06.17 |
| 專利名稱 | 對(duì)腫瘤細(xì)胞有促凋亡功能的Survivin突變體重組腺病毒及獲得方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/861(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/861(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 吳 緬;那沙·阿丁·霍蒂;朱的娥;宋質(zhì)銀;王 宜 |
| 地址 | 230026安徽省合肥市金寨路96號(hào)中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)專利辦公室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 合肥華信專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 余成俊 |
| 國省代碼 | 安徽;34 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種對(duì)腫瘤細(xì)胞有促凋亡功能的Survivin突變體重組腺病毒，包括突變的Survivin基因，其特征在于，所述的Survivin基因序列的第158位堿基a突變?yōu)閏，其基因序列表達(dá)式為atgggtgccccgacgttgccccctgcctggcagccctttctcaaggaccaccgcatctctacattcaagaactggcccttcttggagggctgcgcctgcaccccggagcggatggccgaggctggcttcatccactgccccactgagaacgagccagc158cttggcccagtgtttcttctgcttcaaggagctggaaggctgggagccagatgacgaccccatagaggaacataaaaagcattcgtccggttgcgctttcctttctgtcaagaagcagtttgaagaattaacccttggtgaatttttgaaactggacagagaaagagccaagaacaaaattgcaaaggaaaccaacaataagaagaaagaatttgaggaaactgcgaagaaagtgcgccgtgccatcgagcagctggctgccatggattga蛋白質(zhì)序列第53位氨基酸D相應(yīng)地突變?yōu)锳，蛋白質(zhì)序列表達(dá)式為：MGAPTLPPAWQPFLKDHRISTFKNWPFLEGCACTPERMAEAGFIHCPTENEPA53LAQCFFCFKELEGWEPDDDPIEEHKKHSSGCAFLSVKKQFEELTLGEFLKLDRERAKNKIAKETNNKKKEFEETAKKVRRAIEQLAAMD。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及生物基因工程技術(shù)。所述的Survivin突變體重組腺病毒，將Survivin基因序列的第158位堿基a突變?yōu)閏，蛋白質(zhì)序列第53位氨基酸D相應(yīng)地突變?yōu)锳。其獲得方法包括引入突變、構(gòu)建質(zhì)粒和包裝病毒。引入突變的步驟是首先根據(jù)已知野生型Survivin序列設(shè)計(jì)引物1和引物2，再根據(jù)突變?cè)碓O(shè)計(jì)含突變的引物3和引物4；用引物1和引物2從HeLa庫中釣出Survivin基因，再分別擴(kuò)增Survivin左右兩部分片段，回收后等量加入，變性退火再循環(huán)，形成全長(zhǎng)雙鏈Survivin后進(jìn)行第三輪PCR循環(huán)，擴(kuò)增出含突變的Survivin(Surv-D53A)，此后再通過生物基因工程中常用方法構(gòu)建質(zhì)粒和包裝病毒。從多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，本發(fā)明的重組腺病毒強(qiáng)烈誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞、子宮頸癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞等癌細(xì)胞凋亡。 |
| 國際公布 |
