| 公開(公告)號 | CN1318586C |
| 公開(公告)日 | 2007.05.30 |
| 申請(專利)號 | CN02822098.6 |
| 申請日期 | 2002.10.30 |
| 專利名稱 | 短的雙鏈RNAs的體外合成方法 |
| 主分類號 | C12N15/11(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/11(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A61K31/713(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2001.11.5 US 60/337,975 |
| 申請(專利權(quán))人 | 詹森藥業(yè)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | M·D·德貝克;A·N·哈里斯 |
| 地址 | 比利時比爾斯 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 2002-10-30 PCT/EP2002/012165 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2004.05.08 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 李 波;徐雁漪 |
| 國省代碼 | 比利時;BE |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種用于合成長度少于30個核苷酸的靶特異性短的雙鏈RNAs的方法，包括以下步驟：a)在一種反應(yīng)混合物中混合靶特異性有義寡核苷酸模板和T7RNA聚合酶，以便形成模板延伸的有義寡核糖核苷酸產(chǎn)物；b)在一種反應(yīng)混合物中混合靶特異性反義寡核苷酸模板和T7RNA聚合酶，以便形成模板延伸的反義寡核糖核苷酸產(chǎn)物；和c)讓在步驟a)中獲得的有義寡核糖核苷酸產(chǎn)物與在步驟b)中獲得的互補(bǔ)性反義寡核糖核苷酸產(chǎn)物雜交，其特征在于：步驟a)和b)的寡核苷酸模板包括由圖1所示的截短的T7 RNA聚合酶啟動子序列組成的RNA聚合酶啟動子序列，在所述模板鏈的5’末端用靶特異性模板序列延伸，其中，所述靶特異性模板序列包括位于5’末端的兩個鳥苷，和位于3’末端的兩個胞苷。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及合成短的雙鏈RNAs的領(lǐng)域。披露了利用噬菌體聚合酶和用靶序列特異性單鏈DNA寡核苷酸作模板的體外轉(zhuǎn)錄方法。本發(fā)明特別適用于合成短的干擾RNAs(siRNAs)，業(yè)已證實(shí)這種干擾RNAs是在植物中的轉(zhuǎn)錄后基因沉默期間引起序列特異性RNA降解，以及無脊椎動物和脊椎動物系統(tǒng)的RNA干擾中的關(guān)鍵中間體。 |
| 國際公布 | 2003-05-15 WO2003/040294 英 |
