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使用經(jīng)過加工的臨床樣品通過涂片顯微鏡檢術(shù)、培養(yǎng)和聚合酶鏈式反應(yīng)診斷結(jié)核的方法及其試劑盒

公開(公告)號 CN1856570A  
公開(公告)日 2006.11.01  
申請(專利)號 CN03827070.6  
申請日期 2003.07.29  
專利名稱 使用經(jīng)過加工的臨床樣品通過涂片顯微鏡檢術(shù)、培養(yǎng)和聚合酶鏈式反應(yīng)診斷結(jié)核的方法及其試劑盒  
主分類號 C12N15/10(2006.01)I  
分類號 C12N15/10(2006.01)I;G01N33/483(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 全印度醫(yī)學(xué)科學(xué)院  
發(fā)明(設(shè)計)人 J·S·蒂亞吉;S·查克拉瓦蒂  
地址 印度新德里  
頒證日  
國際申請 2003-07-29 PCT/IB2003/003211  
進入國家日期 2006.03.14  
專利代理機構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所  
代理人 趙艷華  
國省代碼 印度;IN  
主權(quán)項 一種有效且經(jīng)濟的加工可用于簡單、快速、安全、靈敏且準確地診斷細菌感染的臨床樣品的方法,該方法使用包含由通用樣品加工(USP)溶液(由濃度3至6M的鹽酸胍(GuHCl)、濃度40-60mM且pH 7.3-7.7的Tris-Cl、濃度20-30mM的EDTA、濃度0.3-0.8%的十二烷基肌酸鈉、濃度0.1-0.3M的β-巰基乙醇組成)組成的溶液1、由濃度65-70mM且pH6.7-6.8的磷酸鈉組成的溶液2(可選擇地,可以由無菌水替代)、和由濃度0.03-0.08%的Tween 80組成的溶液3、及用于分離DNA的包含濃度8-12%的Chelex 100懸浮液的溶液A、由濃度0.02-0.04%的Triton X-100組成的溶液B和包含濃度0.2-0.4%的Tween 20的溶液C(任選地,可以使用單獨溶液3或具有0.03-0.1%Triton X 100的溶液3代替溶液A、B和C從含高桿菌載量或低廢料的樣品分離DNA)的組合物,所述方法包括步驟: a.獲得臨床樣品, b.將1.5至2體積的溶液1與樣品混合, c.勻漿混合物并避免起泡, d.向勻漿物添加溶液2或無菌水,之后離心獲得沉淀, e.任選地取決于沉淀體積的減少,用溶液1洗滌沉淀, f.用水洗滌經(jīng)溶液1洗滌的沉淀,和 g.將水洗滌后的沉淀重懸在溶液3中,以得到用于診斷的經(jīng)加工樣品。  
摘要 本發(fā)明涉及加工臨床樣品以便通過涂片顯微鏡檢術(shù)、培養(yǎng)或PCR診斷細菌性感染的方法和用于實施該方法的試劑盒。本發(fā)明還涉及兩組對結(jié)核分枝桿菌的DevR基因具有特異性的引物以及使用所述引物通過PCR篩選結(jié)核病患者的方法。  
國際公布 2005-02-03 WO2005/010186 英  
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