復方黃連素片－鹽酸小檗堿的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥復方黃連素片。

供試品細粉溶于沸水中，加鹽酸處理，上清液用流動相稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測鹽酸小檗堿的峰面積，計算出其含量。

1.乙腈

2.稀鹽酸 取鹽酸234mL,加水稀釋至1000mL

3. 磷酸二氫鉀溶液，0.033mol/L

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液 = 40 60

2.2 檢測波長：265nm

2.3 柱溫：室溫

1.稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，求出平均片重，研細，精密稱取總重量的1/20，為供試品。

2.對照品溶液的制備

精密稱取在100°C干燥的鹽酸小檗堿對照品約25mg，置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2ml，用流動相稀釋至刻度，搖勻（每1mL含鹽酸小檗堿0.008mg)。

3,供試品溶液的制備

供試品置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，離心（每分鐘轉(zhuǎn)速位4000轉(zhuǎn))，精密量取上清液2ml，置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻,作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p534。