方法名稱:
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方法名稱: |
瓦松-槲皮素、山柰素的測定-高效液相色譜法 |
應用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定瓦松中槲皮素、山柰素的含量。 本方法適用于景天科植物瓦松Orostachys fimbriatus (Turcz.) Berg.的干燥地上部分。 |
方法原理: |
本品粉末置具塞錐形瓶中,加甲醇-25%鹽酸溶液(4:1)的混合溶液,水浴回流,冷卻,用甲醇補重,搖勻,濾過,續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長360nm處檢測槲皮素、山柰素的吸收值,計算出其含量。 |
試劑: |
1. 甲醇 2. 甲醇-25%鹽酸溶液(4:1)的混合溶液 3. 0.5%磷酸溶液 |
儀器設備: |
1 儀器 1.1高效液相色譜儀 1.2色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于4000。 1.3 紫外吸收檢測器 2色譜條件 2.1流動相:甲醇 0.5%磷酸溶液=47 53 2.2檢測波長:360nm 2.3柱溫:室溫 |
試樣制備: |
1. 稱取供試品 精密稱取本品粉末(過三號篩)1g, 為供試品。 2. 對照品溶液的制備 精密稱取槲皮素對照品、山柰素對照品適量,加甲醇制成每1mL含槲皮素10mg、山柰素20mg的混合溶液。 3. 供試品溶液的制備 取本品粉末(過三號篩)約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇-25%鹽酸溶液(4:1)混合溶液50mL,密塞,稱定重量,置水浴中回流1小時,立即冷卻,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
分別精密吸取對照品溶液10mL和供試品溶液10~20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定槲皮素(C15H10O7)和山柰素(C15H10O6)的峰面積,計算出其含量。 |
參考文獻: |
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005版,一部,p47。 |