急支糖漿—阿魏酸的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定急支糖漿中阿魏酸的含量。

供試品水浴蒸至近干，加甲醇進(jìn)行熱回流提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，以稀鹽酸調(diào)pH1~2，煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取，乙醚提取液再用2%碳酸鈉提取，碳酸鈉提取液用乙酸乙酯洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調(diào)pH1~2，用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，殘渣加甲醇溶解，過濾，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處檢測阿魏酸的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙酸

3. 乙醚

4. 碳酸鈉

5. 鹽酸

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Shim-Pack CLC-ODS分析柱（150×4.6mm，5μm)，理論板數(shù)按阿魏酸峰計算為4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 1%乙酸水 = 28 72

2.2 檢測波長：323nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密吸取本品25mL。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取阿魏酸對照品30mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解，并加至刻度，混勻。精密吸收5mL置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，得對照品溶液。

3.供試品溶液的制備

供試品水浴蒸至近干，加甲醇加熱回流提取2次，每次50mL，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL溶解，以稀鹽酸調(diào)pH1~2，煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚20，10，10，10，10mL提取4次，合并乙醚液，用2%碳酸鈉20，10，10，10mL提取4次，合并提取液，用乙酸乙酯25mL洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調(diào)pH1~2，以乙醚20，10，10，10mL提取4次，合并乙醚液，40~45℃蒸干，殘渣精密加甲醇2mL溶解，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取上述對照品溶液4，8，12，16，20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處測定阿魏酸的吸收值，以進(jìn)樣量對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處測定阿魏酸的吸收值，計算出其含量。

楊水新，嚴(yán)建民，葉勇等. RP-HPLC法測定急支糖漿中阿魏酸的含量. 中國中藥雜志，2000，25（1)：54-55.