青霉素V鉀原料藥－青霉素V鉀－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定青霉素V鉀原料藥中青霉素V鉀的含量。

本方法適用于青霉素V鉀原料藥。

供試品經(jīng)pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長268nm處檢測青霉素V鉀的峰面積，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2. 冰醋酸

3. pH6.5磷酸鹽緩沖液

4. 氫氧化鈉試液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按青霉素V鉀峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：水 乙腈 冰醋酸=65 35 1

2.2 檢測波長：268nm

2.3 柱溫：室溫

1. pH6.5磷酸鹽緩沖液

取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液125mL，加水250mL，混勻，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH至6.5，再用水稀釋至500mL。

2. 氫氧化鈉試液

取氫氧化鈉4.3g，加水使溶解成100mL。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取青霉素V鉀對照品約50mg，置50mL量瓶中，用pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品約50mg，置50mL量瓶中，用pH6.5磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.310。