2.2 移植骨微血管CD34免疫組化染色結(jié)果
術(shù)后3 d,實驗側(cè)移植骨髓腔和骨板見少量棕褐色陽性表達;對照側(cè)移植骨髓腔和骨板見極少量棕褐色陽性表達。術(shù)后1周,實驗側(cè)移植骨髓腔和骨板見棕褐色陽性表達增多;對照側(cè)移植骨髓腔和骨板仍只見極少量棕褐色陽性表達。術(shù)后2周,實驗側(cè)移植骨髓腔和骨板仍見棕褐色陽性表達較多;對照側(cè)移植骨髓腔和骨板見少量棕褐色陽性表達。術(shù)后3周,實驗側(cè)移植骨髓腔和骨板仍見棕褐色陽性表達,哈佛管擴大;對照側(cè)移植骨髓腔和骨板仍見少量棕褐色陽性表達。術(shù)后4周,實驗側(cè)移植骨髓腔和骨板見大量棕褐色陽性表達,哈佛管進一步擴大,哈佛管內(nèi)多處出現(xiàn)棕褐色陽性表達,骨吸收陷窩內(nèi)見棕褐色陽性表達(圖3);對照側(cè)移植骨髓腔和骨板見棕褐色陽性表達增多,哈佛管及骨吸收陷窩內(nèi)可見棕褐色陽性表達(圖4)。術(shù)后6周,兩側(cè)移植骨髓腔和骨板見棕褐色陽性表達,但數(shù)量減少。
2.3 移植骨組織學(xué)切片圖像分析結(jié)果
移植骨墨汁灌注MVD檢測結(jié)果見表1。移植骨CD34免疫組化染色MVD檢測結(jié)果見表2。由表1、2可見,實驗側(cè)與對照側(cè)比較,術(shù)后3 d、1周、2周、3周、4周實驗側(cè)移植骨MVD大于對照側(cè)(P<0.05);術(shù)后6周,兩側(cè)MVD間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。實驗側(cè)術(shù)后3 d、對照側(cè)術(shù)后2周移植骨出現(xiàn)再血管化;術(shù)后3 d、1周、2周、3周、4周,實驗側(cè)移植骨的再血管化程度高于對照側(cè);術(shù)后4周,實驗側(cè)的再血管化程度達到高峰。
3 討論
非血管化骨移植術(shù)后的骨吸收是一個很難避免的問題,盡可能延緩或減少骨吸收,促進骨生長是成功骨移植所需的基本條件。骨形成和局部區(qū)域的血管生成聯(lián)系緊密。本研究選擇動脈蒂植入非血管化自體骨基于動脈生成。動脈生成是指由于動脈阻塞或狹窄,血流再分配使側(cè)支微動脈血流量增加、血管內(nèi)剪切力增加,引起細胞增殖、血管重塑,從而形成大的有功能的側(cè)支傳導(dǎo)動脈[2-3]。這是動脈蒂優(yōu)于靜脈蒂的原因。Kosaki等[4]認為動脈阻塞后,血流再分配,使側(cè)支微動脈(管徑30~50 μm)血流量增加,血管內(nèi)剪切力增大,從而激活內(nèi)皮細胞(endo-theliocyte,EC);罨腅C合成和分泌單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、粒-單核細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、單核細胞間黏附分子-1(monocyte adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管細胞黏附分子-1(vascular celladhesion molecule-1,VCAM-1)作用于單核細胞來促進動脈生成。Abo-Auda等[5]認為在創(chuàng)傷愈合過程中,血管生成是一個包括細胞、生長因子、細胞外基質(zhì)、生物力學(xué)刺激等多因素相互作用的復(fù)雜過程。新生成的血管網(wǎng)可以改善組織細胞的氧和營養(yǎng)物質(zhì)的供給并清除細胞碎片,這對組織修復(fù)非常重要。同樣局部血管分布也影響骨組織的分化。移植部位的低氧張力和高代謝活性促進了血管生成[6]。在此過程中,周圍血管為骨修復(fù)提供血供,血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、TGF-β和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogene-tic protein,BMP)等參與了對血管生成和骨再生的雙重調(diào)節(jié),使骨修復(fù)能夠順利完成。本實驗結(jié)果顯示,兩種反映微血管生成情況的方法結(jié)果一致。在研究中可以觀察到將兔頜外動脈蒂植入游離自體橈骨后的再血管化過程:在術(shù)后3 d,實驗側(cè)出現(xiàn)再血管化,而對照側(cè)術(shù)后2周移植骨出現(xiàn)再血管化。術(shù)后3 d、1周、2周、3周、4周實驗側(cè)均比對照側(cè)有利于移植骨的血管生成。
MVD的最大值出現(xiàn)在各組術(shù)后4周。實驗側(cè)術(shù)后4周再血管化程度達到高峰;術(shù)后6周再血管化程度有所下降,處于相對平緩階段。對照側(cè)移植骨的再血管化在術(shù)后2、3、4、6周發(fā)生,術(shù)后3周再血管化程度有所下降,其余時間段血管生成程度相當(dāng)。以上結(jié)果說明動脈蒂的植入可以早期促進移植骨的血管生成醫(yī).學(xué).全.在.線gydjdsj.org.cn。
本研究是將單純動脈蒂植入非血管化自體骨來探討移植骨血管生成情況的動物實驗。以往有人進行帶血管蒂骨瓣移植,但血管蒂能到達的區(qū)域有限,其適應(yīng)證范圍小。非血管化自體骨聯(lián)合受區(qū)的動脈蒂植入則是相對簡單易行的方法。實驗研究證明了動脈蒂植入非血管化自體骨的血管再生的范圍和程度,為進一步探討移植骨的愈合機制提供了實驗基礎(chǔ)。