隨著電子技術、流式細胞技術、激光技術、電子計算機技術和新熒光化學物質(zhì)等多種高科技術在臨床檢驗工作的應用,血細胞分析儀在自動化程度、先進功能和完美設計方面已經(jīng)提高到一個新的階段。BC-5500型五分類血液細胞分析儀是深圳邁端生物醫(yī)療電子股份有限公司近年來推出的較新產(chǎn)品,并在臨床檢驗市場中得到了較好的推廣使用。本文以血細胞分析流程為線索對其工作原理展開論述,為廣大臨床工程師及血細胞分析檢驗人員提高設備使用效率和保養(yǎng)質(zhì)量,有效延長設備使用壽命提供理論上的參考。
1、吸取樣本根據(jù)配置的不同,本分析儀提供三種進樣方式。分別為:開放進樣方式、封閉進樣方式、自動進樣方式。其中。開放進樣方式支持全血和預稀釋模式,封閉進樣和自動進樣方式支持全血模式。在自動或封閉進樣方式下,分析儀將吸取180μl的全血樣本。在開放進樣的全血工作模式下,分析儀將吸取120μl的全血樣本。在開放進樣的預稀釋工作模式下,操作者應先將40μl的末梢血樣本和120μl的稀釋液在機外混合,形成稀釋比為1:4的稀釋樣本,然后再將此稀釋樣本送至分析儀進行采樣,分析儀將吸入120μl的稀釋樣本。
2、稀釋樣本待測樣本采集到分血閥后,根據(jù)檢測的需要快速準確地被分為四份。然后,在并行的四個稀釋流程中經(jīng)過不同的試劑作用,分別形成用于紅細胞/血小板測量、血紅蛋白測量、白細胞分類測量和白細胞計數(shù)測量的檢測樣本。
2.1 全血模式的樣本稀釋流程
2.1.1 紅細胞/血小板稀釋
全血樣本8.3μl-→加稀釋液2.992ml變成1:361的樣本-→取60μl再加稀釋液2.94ml得稀釋比為1::18050的待檢測樣本。
2.1.2 血紅蛋白稀釋
全血樣本6μl-→加入稀釋液1.994ml和M-50LH溶血劑1.0ml變成1:500檢測樣本。
2.1.3 白細胞分類稀釋
全血樣本20μl-→加M-50LEO(Ⅰ)溶血劑1.02ml再加M-50LEO(Ⅱ)溶血劑0.32ml以稀釋成1:68的白細胞檢測樣本。
2.1.4 白細胞計數(shù)稀釋
全血樣本20μl-→加M-50LBA溶血劑1.02ml稀釋為1:52的白細胞檢測樣本。
2.2 預稀釋模式下的樣本稀釋流程
2.2.1 紅細胞/血小板稀釋
40μl末梢血樣本-→加稀釋液120μl變成1:4的樣本-→取其8.3μl加 2.992ml稀釋液為1:1444的樣本-→取此樣本60μl加2.94ml的稀釋液得1:72200的待測樣本。
2.2.2 血細蛋白稀釋
40μl末梢血樣本-→加稀釋液120μl變成1:4的樣本-→取6μl先加稀釋液1.994ml,再加M-50LH溶血劑約1.0ml得到1:2000的待測樣本。
2.2.3 白細胞分類稀釋
40μl末梢血樣本-→加稀釋液120μl變成1:4的樣本-→取其20μl加M-50LEO(Ⅰ)溶血劑1.02ml,再加M-50LEO(Ⅱ)溶血劑得到1:272的待測樣本。
2.2.4 白細胞計數(shù)稀釋
40μl末梢血樣本-→加稀釋液120μl變成1:4的樣本-→取其20μl加M-50LBA溶血劑1.02ml,得到1:208的待測樣本。
3、白細胞測量本機采用激光流式細胞技術進行參數(shù)取樣,得到血細胞大小及細胞內(nèi)部信息的二維分布圖(即散點圖),進而經(jīng)過滿足特定運算關系的邏輯電路處理,在電腦顯示終端輸出WBC、Bas#、Bas%、Lym%、Neu%、Mon%、Eos%、Lyn#、Mon#、Eos#、Neu#等測量結(jié)果。
4、血紅蛋白濃度測量待測樣本進入比色池中,在比色池的一端讓LED光管發(fā)出波長為525nm的單色光照射血紅蛋白復合物溶液。在另一端通過光電管接收透射光,轉(zhuǎn)換為電壓信號,并與醫(yī).學全在線gydjdsj.org.cn比色池中加入樣本之前的相應信號比較,經(jīng)過滿足
HGB(單位為g/L)=常數(shù)×Ln( )特定運算關系的DSP邏輯電路處理后將分析結(jié)果顯示在“計數(shù)”界面。
5、紅細胞/血小板測量
本分析儀利用電阻抗法對紅細胞/血小板進行計數(shù)。(如下圖所示),小孔兩側(cè)有一對正負電極,連接電流為Ⅰ的恒流電源。由于細胞具有不良導體的特性,其穿過小孔瞬間使兩電極間電阻r(t)立即增大,電極間電壓u(t)隨之增大。
u(t)=Ir(t)
u(t)函數(shù)脈沖及其脈沖幅度就能再現(xiàn)出穿過小孔細胞的數(shù)量和體積,u(t)信息經(jīng)相應邏輯運算處理的DSP電路即可得出在設備終端顯示的RBC、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD、PLT、MPV、PDW、PCT等技術參數(shù)。
6、小結(jié)BC-5500五分類血液細胞分析儀采用電阻抗法檢測紅細胞和血小板的數(shù)目以及體積分布,采用比色法測量血紅蛋白濃度,采用半導體激光流式細胞技術獲得白細胞總數(shù)和五類白細胞的分類統(tǒng)計計數(shù)。經(jīng)過吸取樣本-→稀釋樣本-→測量樣本-→結(jié)果顯示-→液路沖洗的工作流程提供23項血液參數(shù)以及4項研究參數(shù)的血量分析結(jié)果,并提供2個直方圖和2個散點圖。