三．茚三酮比色法：
1事理：氨基酸在必然pH規(guī)模內(nèi)，能與茚三酮生成蘭紫色化合物。可以用比色法定量測(cè)定。
2試劑：
（1)磷酸緩沖液（pH.8.04)制備體例如下：
稱(chēng)磷酸二氫鉀4.5350g。定容500ml
稱(chēng)NAH2PO4·12H2O 11.9380g分袂消融定容500ml
取磷酸二氫鉀10ml與磷酸氫二鈉190ml同化即為pH8.04的緩沖液
（2)2%茚三酮溶液醫(yī),學(xué).全,在.線gydjdsj.org.cn：
稱(chēng)茚三酮1g→溶于35ml熱水→插手40mg氯化亞錫（SnCl2·H2O)攪拌過(guò)濾（作防腐劑)→于冷暗處住宿→定容50ml
① 氨基酸標(biāo)液
稱(chēng)干燥氨基酸（如異亮氨酸)0.2000g→消融定容100ml→搖勻→吸10ml于此外100ml容量瓶
定容100ml，即得200Ug/ml標(biāo)液
3操作體例：
（1)繪制尺度曲線：
取7個(gè)25ml容量瓶，吸收標(biāo)液 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0ml于7個(gè)25ml容量瓶，加水填補(bǔ)至容積為4ml，然后加茚三酮緩和沖液各1ml，于水浴加熱15分鐘，冷卻后定容25ml，靜置15分鐘，在570nm下測(cè)消光值，繪制尺度曲線。
（2)樣品測(cè)定：
取樣品5.00~10.0g（液體樣5-10ml)→更甚杯中→加50ml水和活性碳約5g→加熱過(guò)濾→用30—40ml熱水洗滌活性炭→吸澄清樣液1~4ml→加茚三酮緩和沖液各1ml水浴加熱15分鐘，冷卻定容，靜置15分鐘于570nm下測(cè)定消光值，按下式計(jì)較氨基酸含量。
氨基酸含量（毫克/100克)=C/（W×1000)×100來(lái)歷：的美男編纂們
C——從尺度曲線上查得得氨基酸的量（Ug)
W——測(cè)定燈揭捉品溶液相當(dāng)于樣品的量（g)
注重事項(xiàng)：
茚三酮受陽(yáng)光、溫度、濕度、空氣等影響易被氧化呈淡紅或深紅色，使用前要進(jìn)行純化，體例如下：取10g茚三酮容于40ml熱水中，加一克活性炭，搖勻靜置30分鐘醫(yī),學(xué).全,在.線gydjdsj.org.cn，過(guò)濾，將濾液放入冰箱中過(guò)濾，即呈現(xiàn)蘭色結(jié)晶，過(guò)濾，用2ml冷水洗滌結(jié)晶，置干耘縵泱中干燥，裝瓶備用。
思慮題：
1 試述卵白質(zhì)測(cè)定中，樣品消化過(guò)程所必需注重的事項(xiàng)，消化過(guò)程中內(nèi)容物顏色發(fā)生什么轉(zhuǎn)變？為什么？
2 樣品經(jīng)消化進(jìn)行蒸餾前，為什么沖要手氫氧化鈉？這時(shí)溶液發(fā)生什么轉(zhuǎn)變？為什么？如不美觀沒(méi)有轉(zhuǎn)變，聲名侍趵硎題？須采用什么法子？
3 硫酸銅及硫酸鉀在測(cè)定中起了什么浸染？
4 試述氨基酸態(tài)氮的測(cè)定事理。
5 結(jié)不美觀計(jì)較中為什么要乘上卵白質(zhì)系數(shù)？
嘗試：①水不美觀中酸度的測(cè)定。
②糕點(diǎn)中和脂肪的測(cè)定。
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