豬分子標(biāo)記選擇之組織樣本的采集和DNA提是怎樣的?
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取1塊耳組織(約10毫 克)置于1. 5毫升離心管內(nèi),用小剪刀將其剪碎。加人0. 4毫升組 織DNA提取液[50毫摩/升Tris-Cl溶液(pH8),100毫摩/升一 EDTA溶液(pH8),100毫摩/升
氯化鈉溶液,1 %SDS溶液],再加 人蛋白酶K至終濃度100微克/升,55C水浴消化過夜。加入 RNase至終濃度20納克/毫升,37X:溫育1小時。用苯酚和1 : 1 苯酚、氯仿溶液各抽提1次,每次以12 000轉(zhuǎn)/分處理10分鐘,將 其上清液移到另一離心管中。加入1/10體積3摩/升NaAc (pH5. 2),混勻后加人2倍體積的無水
乙醇沉淀DNA,將DNA絮 狀沉淀挑入新離心管中,并用70%乙醇洗1次,真空抽干乙醇。 以適量TE溶液或滅菌雙蒸水溶解DNA。
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