如何給母豬人工受精
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人工授精站實(shí)驗(yàn)室是精液檢查、處理、貯存的場(chǎng)所,為了生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的、符合輸精要求的精液,一定把好質(zhì)量關(guān),保證出站的每一瓶精液的活力不低于0.7,72小時(shí)之內(nèi)保存活率不受影響,特對(duì)實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)作做如下規(guī)定! 1、實(shí)驗(yàn)室要求整潔、干凈、衛(wèi)生,每周徹底清潔一次; 2、非實(shí)驗(yàn)室工作人員在正常情況下不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,采精員也不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室; 3、所有儀器設(shè)備應(yīng)在仔細(xì)閱讀說明書后,由專人按操作規(guī)程使用和維護(hù)保養(yǎng);特別是高壓蒸氣滅菌器,超聲波洗凈器,雙蒸水器使用時(shí)更應(yīng)注意人身安全; 4、各種電器設(shè)備應(yīng)按其要求選擇適應(yīng)插座,除冰箱、精液保存箱、恒溫培養(yǎng)箱等外,一般電器要求人走斷電,干燥箱無(wú)人時(shí)設(shè)定溫度不應(yīng)高于100℃; 5、物品、器皿的清洗、消毒方法:所有器皿應(yīng)以洗潔精或洗衣粉清洗干凈,再以蒸餾水漂洗,60℃干燥(玻璃用品干燥溫度可高于100℃)后,以錫紙包扎器皿開口,玻璃器皿180℃ 1小時(shí)進(jìn)行干熱滅菌,非耐熱器皿、用具以高壓滅菌器121℃、20分鐘濕熱滅菌; 6、稀釋液的配制、精液檢查、稀釋、分裝一定按照人工授精操作規(guī)程進(jìn)行; 7、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備保持清潔衛(wèi)生:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用的儀器設(shè)備,如顯微鏡、干燥箱、水浴鍋、17℃精液保存箱、冰箱、37℃恒溫板、電子天平等,必然保持清潔衛(wèi)生,顯微鏡鏡頭(目鏡和物鏡),應(yīng)每2周用二甲苯浸泡一次,保持清潔; 8、采精室與實(shí)驗(yàn)室之間的傳遞口的兩測(cè)窗只有在傳遞物品時(shí)才能按先后順序開啟使用; 9、實(shí)驗(yàn)室地板、實(shí)驗(yàn)臺(tái)保持干凈清潔; 10、下班離開實(shí)驗(yàn)室前一定檢查電源、水龍頭、門、窗是否關(guān)閉好,做到萬(wàn)無(wú)一失方可離開實(shí)驗(yàn)室,確保安全; 11、防火防盜,注意安全。
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采精的操作規(guī)程 1、采精員一手帶雙層手套,另一手持37℃保溫杯(內(nèi)裝1次性食品袋)用于收集精液; 2、飼養(yǎng)員將待采精的公豬趕至采精欄,用0.1%
高錳酸鉀溶液清洗其腹部和包皮,再用溫水(夏天用自來(lái)水)清洗干凈,避免藥物殘留對(duì)精子的傷害; 3、采精員擠出公豬包皮積尿,按摩公豬包皮部,刺激其爬跨假臺(tái)畜; 4、公豬爬跨假臺(tái)畜并逐步伸出yin莖,脫去外層手套,將公豬yin莖
龜頭導(dǎo)入空拳; 5、用手(大拇指與龜頭相反方向)緊握伸出的公豬yin莖螺旋狀龜頭,順其向前沖力將yin莖的“s’’狀彎曲拉直,握緊yin莖龜頭防止其旋轉(zhuǎn),公豬即可射精; 6、用四層沙布過濾收集濃份精液于保溫杯內(nèi)的一次性食品袋內(nèi),最初射出的少量精液含精子很少,可以不必接取,有些公豬分2-3個(gè)階段將濃份精液射出,直到公豬射精完畢,射精過程歷時(shí)5-7分鐘; 7、采精員應(yīng)注意安全,一旦公豬出現(xiàn)攻擊行為,采精員應(yīng)立刻逃至安全角; 8、下班之前徹底清洗采精欄; 9、采精期間不準(zhǔn)歐打公豬,防止出現(xiàn)性抑制; 10、采精頻率:成年公豬每周2次,青年公豬(1歲左右)每周1次。最好固定每頭公豬的采精頻率; 11、公豬采精調(diào)教:①后備公豬7月齡開始進(jìn)行采精調(diào)教;②每次調(diào)教時(shí)間不超過15分鐘;③一旦采精獲得成功,分別在第2、3天再采精1次,進(jìn)行鞏固掌握該技術(shù);④采精調(diào)教可采用發(fā)情母豬誘導(dǎo)、觀摩有經(jīng)驗(yàn)公豬采精、以發(fā)情母豬分泌物刺激等方法;⑤調(diào)教公豬要有耐心,不準(zhǔn)打罵公豬;⑥注意公豬和調(diào)教人員的安全。
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稀釋液配制操作規(guī)程 1、配制稀釋液的藥品要求選用分析純?cè)噭,?duì)含有結(jié)晶水的試劑要按摩爾濃度進(jìn)行換算(如含水
葡萄糖和無(wú)水
葡萄糖); 2、按稀釋液配方,用稱量紙、電子天平準(zhǔn)確稱量藥品; 3、按1000ml、2000ml劑量稱量稀釋粉,置于密封袋中; 4、使用前將稱量好的稀釋粉溶于定量的雙蒸水中,可用磁力攪拌器助其溶解; 5、用濾紙過濾,以盡可能除去雜質(zhì); 6、用1n稀鹽酸或1n氫氧化鈉調(diào)整bts稀釋液的ph值為7.2(6.8-7.4)左右,滲透壓為330mosm;稀釋液配好,應(yīng)及時(shí)貼上標(biāo)簽,標(biāo)明品名、配制日期和時(shí)間、經(jīng)手人等; 7、要認(rèn)真檢查已配制好的稀釋液成品,發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)糾正; 8、液態(tài)狀稀釋液冰箱4℃保存,不超過24小時(shí),超過有效貯存期的變質(zhì)稀釋液應(yīng)廢棄! 【嘿|(zhì)量的檢查操作規(guī)程 1、精液量:以電子天平稱量精液,按每克1毫升計(jì),避免以量筒等轉(zhuǎn)移精液盛放容器的方法測(cè)量精液體積; 2、顏色:正常的精液是乳白色或淺灰白,精子密度越高,色澤愈濃,其透明度愈低。如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液,若帶有淡紅色或紅褐色是含有血液。這樣的精液應(yīng)舍棄不用,會(huì)同獸醫(yī)尋找原因; 3、氣味:豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應(yīng)廢棄; 4、ph值(酸堿度):以ph計(jì)測(cè)量(ph計(jì)使用見說明書); 5、精子活率檢查:活率是指呈直線運(yùn)動(dòng)的精子百分率,在顯微鏡下觀察精子活率,一般按0.1-1.0 的十級(jí)評(píng)分法進(jìn)行,鮮精活率要求不低于0.7; 6、精子密度:指每毫升精液中所含的精子數(shù),是確定稀釋倍數(shù)的重要指針。要求用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)或精液密度儀測(cè)定。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法:①以微量加樣品取具有代表性原精液100μl,3%nac l900μl,混勻,使之稀釋10倍;②在血細(xì)胞計(jì)數(shù)室上放一蓋玻片,取1滴上述精液放入計(jì)數(shù)板的槽中,靠虹吸將精液吸入計(jì)數(shù)室內(nèi);③在高倍鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子總數(shù),將該數(shù)乘以50萬(wàn),即得原精液每毫升的精子數(shù)(即精液密度)。精液密度儀使用見其說明書; 7、精子畸形率:畸形率是指異常精子的百分率,一般要求畸形率不超過18%,其測(cè)定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆沙染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率,公豬使用過頻或高溫環(huán)境會(huì)出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子;畸形精子種類很多,如:巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子,頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每?jī)芍軝z查一次精子畸形率; 8、按要求做好精液質(zhì)量檢查登記表; 9、實(shí)事求是地填寫種公豬健康狀況登記表,從而真實(shí)地反應(yīng)種公豬健康狀況。
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精液的稀釋操作規(guī)程 1、精液采集后應(yīng)盡快稀釋,原精貯存不超過30分鐘; 2、未經(jīng)質(zhì)量檢查或檢查不合格(活力0.7以下)的精液不能稀釋; 3、稀釋液與精液要求等溫稀釋,兩者溫差不超過1℃,即稀釋液應(yīng)加熱至33℃-37℃,以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn),來(lái)調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,絕不能反過來(lái)操作; 4、稀釋時(shí),將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁緩慢加入到精液中,然后輕輕搖動(dòng)或用消毒玻璃棒攪拌,使之混合均勻; 5、如作高倍稀釋時(shí),應(yīng)進(jìn)行低倍稀釋(1:1-2),稍待片刻后再將余下的稀釋液沿壁緩慢加入,以防造成“稀釋打擊”; 6、稀釋倍數(shù)的確定:活率≥0.7的精液,一般按每個(gè)輸精劑量含40億個(gè)總精子,輸精量為80-90ml確定稀釋倍數(shù),例如:某頭公豬一次采精量是200ml ,活力為0.8,密度為2億/ml,要求每個(gè)輸精劑量是含40億精子,輸精量為80ml,則總精子數(shù)為200ml×2億/ml=400億,輸精頭份為400億÷40億=10份,加入稀釋液的量為10×80ml-200ml=600ml; 7、稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力一樣,即可進(jìn)行分裝與保存,如果活力下降,說明稀釋液的配制或稀釋操作有問題,不宜使用,并應(yīng)查明原因加以改進(jìn); 8、不準(zhǔn)隨便更改各種稀釋液配方的成分及其相互比例,也不準(zhǔn)幾種不同配方稀釋液隨意混合使用;
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精液的常溫保存的操作規(guī)程 1、精液稀釋后,檢查精液活率,若無(wú)明顯下降,按每頭份80-90 ml分裝; 2、瓶上加蓋密封,并在輸精瓶上寫清楚公豬的品種、耳號(hào),采精日期(月、日、時(shí)); 3、置22℃-25℃的室溫1小時(shí)后(或用幾層毛巾包被好后)直接放置17℃冰箱中; 4、保存過程中要求每12小時(shí)將精液混勻一次,防止精子沉淀而引起死亡; 5、每天檢查精液保存箱溫度并進(jìn)行記錄,若出現(xiàn)停電應(yīng)全面檢查貯存的精液質(zhì)量; 6、盡量減少保存精液保存箱關(guān)開次數(shù),以免造成對(duì)精子的打擊而死亡! “l(fā)情鑒定技術(shù)的操作規(guī)程 1、母豬發(fā)情周期平均21天(19--23天),大多數(shù)經(jīng)產(chǎn)母豬一般在仔豬斷奶后的一周內(nèi)(3--7天),可再次發(fā)情排卵,配種受胎; 2、母豬發(fā)情周期可分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和間情期,母豬只有在發(fā)情才允許公豬爬跨或稱之為站立反應(yīng),此性行為表現(xiàn)可作為母豬適時(shí)輸精的指標(biāo); 3、各期特征,略述如下:①發(fā)情前期:母豬舉動(dòng)不安,外陰腫脹,并由淡黃色變?yōu)榧t色這種變化在后備母豬較為明顯;陰道有粘液分泌,其粘度漸漸增加。在此期母豬不允許人騎在背上,平均可有2.7天,不宜輸精配種。②發(fā)情期:平均約2.5天,特征為母豬陰部腫脹及紅色開始減退,分泌物也變濃厚,粘度增加。此時(shí)母豬允許壓背而不動(dòng),壓背時(shí),母豬雙耳豎起向后,后肢緊繃。③發(fā)情后期:1-2天,發(fā)情母豬的陰部完全回復(fù)正常,不允許公豬爬跨;④間情期:13-14天,完全恢復(fù)正常狀態(tài); 4、發(fā)情鑒定:每日最少要做兩次試情(每天上午6:30-8:30和下午16:00-17:30進(jìn)行發(fā)情檢查),即在安靜的環(huán)境下,有公豬在旁時(shí),壓背,以觀察其站立反應(yīng)。試情公豬一般選用善于交談、唾液分泌旺盛、行動(dòng)緩慢的老公豬; 5、作好發(fā)情檢查的完整記錄:包括發(fā)情母豬耳號(hào)、胎次、發(fā)情時(shí)間、外陰部變化、壓背反應(yīng)等,尤其是后備母豬的記錄! ≥斁僮饕(guī)程 1、輸精次數(shù):①第1次自然交配、第2、3次人工授精;②2次人工授精;③3次人工授精; 2、輸精時(shí)間:①斷奶后3-6天發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母豬,發(fā)情出現(xiàn)站立反應(yīng)后6-12小時(shí)進(jìn)行第1次輸精配種;②后備母豬和斷奶后7天以上發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)母豬,發(fā)情出現(xiàn)站立反應(yīng),就進(jìn)行配種(輸精); 3、精液檢查:從17℃保存箱取出的精液,輕輕搖勻,用已滅菌的滴管取1滴放于預(yù)熱的載玻片,置于37℃的恒溫板上片刻,用顯微鏡檢查活力,精液活力≥0.7,才可進(jìn)行輸精; 4、將試情公豬趕至待配母豬欄之前,使母豬在輸精時(shí)與公豬口鼻部接觸; 5、輸精人員消毒清潔雙手; 6、用0.1%高錳酸鉀水溶液清潔母豬外陰、尾根及臀部周圍,再用溫水浸濕毛巾,擦干外陰部; 7、從密封袋中取出沒受任何污染的一次性輸精管(手不應(yīng)接觸輸精管前2/3部分),在其前端涂上精液作為潤(rùn)滑液; 8、將輸精管45度角向上插入母豬生殖道內(nèi),輸精管進(jìn)入3-4cm之后,順時(shí)針旋轉(zhuǎn),當(dāng)感覺有阻力時(shí),繼續(xù)緩慢旋轉(zhuǎn)同時(shí)前后移動(dòng),直到感覺輸精管前端被鎖定(輕輕回拉不動(dòng)),并且確認(rèn)真正被子宮頸鎖定; 9、從精液貯存箱取出質(zhì)量合格的精液,確認(rèn)公豬品種、耳號(hào); 10、緩慢顛倒搖均精液,用剪刀剪去瓶嘴,接到輸精管上,開始進(jìn)行輸精; 11、用針頭在輸精瓶底部扎一個(gè)小孔,撫摸母豬的ru房或外陰、壓背刺激母豬,使其子宮收縮產(chǎn)生負(fù)壓,將精液吸納;輸精時(shí)勿將精液擠入母豬生殖道內(nèi),防止精液倒流; 12、控制輸精瓶的高低來(lái)調(diào)節(jié)輸精時(shí)間,輸精時(shí)間要求3-5分鐘,輸完一頭母豬后,應(yīng)在防止空氣進(jìn)入母豬生殖道的情況下,把輸精管后端一小段折起,放在輸精瓶中,使其滯留在生殖道內(nèi)3-5分鐘,讓輸精管慢慢滑落; 13、從17℃精液保存箱中取出的精液,無(wú)需升溫至37℃,搖勻后可直接輸精,但檢查精液活力需將玻片預(yù)熱至37℃; 14、經(jīng)產(chǎn)母豬用一次性海綿頭輸精管,輸精前檢查海綿頭是否松動(dòng);后備母豬用一次性螺旋頭輸精管。為防止子宮炎發(fā)生,每頭母豬每次輸精都應(yīng)使用一條新的輸精管; 15、每頭母豬在一個(gè)發(fā)情期內(nèi)要求至少輸精兩次,最好三次,兩次輸精時(shí)間間隔8小時(shí)左右; 16、認(rèn)真登記母豬生產(chǎn)卡、配種記錄。
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