如何進(jìn)行鴨瘟的實(shí)驗(yàn)室診斷?
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(1) 病料的采集與處理無(wú)菌采集剛死或?yàn)l臨死亡鴨的 肝、脾臟，按病毒病料的常規(guī)處理方法,制作分離病毒無(wú)菌病 料樣品。(2) 病毒分離與動(dòng)物回歸試驗(yàn)取處理好的無(wú)菌病料接種9?14日齡鴨胚的絨毛尿囊膜，0. 2毫升/胚，于38°C孵育， 收集合格的尿囊液，以同樣的方法接種鴨胚并傳至4代，分別 收集48?96小時(shí)死亡胚胎的尿囊液，過(guò)濾細(xì)菌，保存。剖檢死亡胚體，可見皮膚出血，其中以頭部、胸部最為嚴(yán) 重。有的肝臟有出血點(diǎn)或壞死。動(dòng)物回歸試驗(yàn):將30只未免疫的20日齡健康鴨分成3 組，10只/組。實(shí)驗(yàn)組腿部肌內(nèi)注射第三代死亡鴨胚尿囊液， 0.2毫升/只。疫苗組先用鴨瘟疫苗免疫，7日后，腿部肌內(nèi)注 射第四代死亡鴨胚尿囊液，〇. 2毫升/只。對(duì)照組注射等量生 理鹽水。如果實(shí)驗(yàn)組在注射鴨胚尿囊液96小時(shí)后出現(xiàn)流淚， 采食量下降，體溫升高，精神沉郁等癥狀，并陸續(xù)死亡,解剖可 見鴨瘟的剖檢病變。而對(duì)照組和疫苗組全部健康，無(wú)死亡，則 分離到的病毒為鴨瘟病毒。(3) 鴨瘟的血清學(xué)診斷① 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)，從血、肝、脾等鴨瘟病料中直接檢出病毒，達(dá)到提前 檢出鴨瘟病毒的目的。通過(guò)間接ELISA試驗(yàn)檢測(cè)鴨群血清， 可以快速、敏感、特異地檢出血清中抗鴨瘟病毒抗體，本試驗(yàn) 檢測(cè)鴨瘟抗體的敏感性比血清中和試驗(yàn)高得多。② 微量固相放射免疫試驗(yàn)（Micro^SPRIA) 以表面能吸 附抗體的塑料或其他材料作為固相載體，用同位素標(biāo)記抗體 或抗原，以測(cè)定相應(yīng)抗原或抗體的一種微量檢測(cè)技術(shù)。其優(yōu) 點(diǎn)是特異性強(qiáng)、敏感性高、快速和經(jīng)濟(jì)，但所需實(shí)驗(yàn)條件要求 較高。③ 中和試驗(yàn)用已知鴨瘟病毒的免疫血清與分離株進(jìn)行 中和試驗(yàn)，或用已知病毒測(cè)定未知血清及效價(jià)，中和試驗(yàn)可作 為抗體檢測(cè)和病毒鑒定的可靠方法。據(jù)報(bào)道，血清抗體中和 指數(shù)達(dá)1.75以上的，表示此鴨曾受鴨瘟強(qiáng)毒感染。中和試驗(yàn) 技術(shù)要求高，操作復(fù)雜，周期長(zhǎng)，不適用于基層和大量樣品檢 測(cè)。(4) B瘇的分子生物學(xué)診斷聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR)檢 測(cè)鴨瘟病毒：主要用于鴨瘟病毒細(xì)胞培養(yǎng)毒和禽胚尿囊液培養(yǎng)毒及組織樣品的鴨瘟病毒診斷。程安春等建立的PCR檢 測(cè)鴨瘟病毒，在鴨感染鴨瘟后4小時(shí)，就可從糞便等檢測(cè)到鴨 瘟病毒，特別適合于鴨瘟的早期診斷。(5)電鏡檢査對(duì)分離的鴨瘟病毒進(jìn)行電鏡觀察可見皰 疹病毒的典型形態(tài)結(jié)構(gòu)，病毒粒子直徑范圍為32?181納米， 有一個(gè)致密的核心區(qū)和一層著色較淡的套膜。
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